聚乙二醇接枝聚乳酸纳米微球的制备及其体外溶血性能研究

论文摘要

本研究工作的目的是以本室制备的新型聚乙二醇接枝聚乳酸（PPLA）为原料,通过自组装方式制备纳米微球,并研究其纳米微球的体外溶血性能。首先对PPLA在水中的自组装性能进行研究,探讨其作为纳米药物载体的可行性和稳定性。目测法得到其溶解度为（2.16～4.32）×10-2mg·mL-1;荧光法得到聚合物的临界胶束浓度为1.12×10-3mg·mL-1;透射电子显微镜显示该聚合物在水中的自组装聚集体为纳米级球形。动态激光光散射测试纳米微球的粒径和Zeta电位发现:在微球的制备过程中,聚合物的亲/疏水性比例、水相接枝及水溶液的pH值对其影响显著;而制备后,稀释和冷冻对其无显著影响,改变微球的环境pH值至酸性出现聚集,至碱性无显著影响。研究结果显示,该聚合物在水和磷酸钠盐缓冲液中可形成稳定的纳米微球,通过微球的制备条件和存在环境可控制其粒径及Zeta电位。此外,我们采用FITC标记牛血清白蛋白（FITC-BSA）为模型蛋白,测试了其纳米微球对非特异性蛋白质的吸附,结果显示与聚乳酸（PLA）微球相比,PPLA明显降低了对FITC-BSA的吸附。研究利用制备的不同粒径及浓度的PPLA纳米微球,探讨了粒径及纳米微球浓度对红细胞溶血性的影响,结果显示,浓度越小溶血率越小,粒径为200～960.8nm的微球的临界溶血浓度范围为1.5～2.0 mg·mL-1;在相同浓度下,粒径越大溶血率越小。以胰岛素为亲水蛋白药物模型,制备了载药PPLA纳米微球,发现水相介质对胰岛素的包裹率、载药纳米微球的粒径和Zeta电位有一定影响。最后,利用包裹胰岛素的纳米微球,研究了其溶血性能,并与PPLA纳米空球、胰岛素的溶血性能比较;研究结果显示包裹胰岛素的纳米微球溶血率极低,比PPLA纳米空球和相当于完全释放后得到的胰岛素浓度的溶血率都低。综上所述,PPLA具有明显的自组装性质,可在水相介质中自发或包裹药物形成纳米微球,其空球的溶血性能与粒径相关;能有效包裹胰岛素,并实现缓释,包裹胰岛素后微球的溶血率比空球和药物本身都低,结果显示了PPLA在药物缓释方面的潜在价值。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 绪论
• 1.1 问题的提出及研究意义
• 1.2 国内外研究现状
• 1.2.1 纳米微球的研究现状
• 1.2.2 纳米药物载体安全性研究现状
• 1.3 本文研究目的和研究内容
• 2 PPLA纳米微球的制备及性能表征
• 2.1 引言
• 2.2 仪器与试剂
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 PPLA与PLA空纳米微球的制备
• 2.3.2 PPLA空纳米微球的性能表征
• 2.4 实验结果
• 2.4.1 PPLA纳米微球的表面形貌
• 2 4.2 PPLA的溶解度与临界胶束浓度
• 2.4.3 PPLA纳米微球的抗非特异性蛋白吸附性
• 2.4.4 制备条件对纳米微球粒径及Zeta电位的影响
• 2.4.5 存在环境对纳米微球稳定性的影响
• 2.5 讨论
• 2.6 本章小结
• 3 PPLA纳米微球的粒径及浓度对溶血性能的影响
• 3.1 引言
• 3.2 仪器与试剂
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 PPLA纳米微球的制备
• 3.3.2 PPLA纳米微球的浓度对溶血率的影响
• 3.3.3 PPLA纳米微球的粒径对溶血率的影响
• 3.4 实验结果
• 3.4.1 PPLA纳米微球的粒径及Zeta电位
• 3.4.2 浓度对PPLA纳米微球溶血率的影响
• 3.4.3 粒径对PPLA纳米微球溶血率的影响
• 3.5 讨论
• 3.6 本章小结
• 4 包裹胰岛素的PPLA纳米微球的制备及表征
• 4.1 引言
• 4.2 仪器与试剂
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 胰岛素标准曲线的制备
• 4.3.2 丫啶橙PPLA纳米微球的制备
• 4.3.3 胰岛素PPLA纳米微球的制备
• 4.3.4 载药PPLA纳米微球的性能表征
• 4.3.5 重现性与稳定性考察
• 4.4 实验结果
• 4.4.1 包裹PPLA纳米微球的表面形貌
• 4.4.2 水相介质对胰岛素PPLA纳米微球的影响
• 4.4.3 胰岛素PPLA纳米微球的体外释放
• 4.4.4 重现性与稳定性考察
• 4.5 讨论
• 4.6 本章小结
• 5 载药对PPLA纳米微球溶血性的影响
• 5.1 引言
• 5.2 仪器与试剂
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 PPLA纳米微球的制备
• 5.3.2 溶血实验
• 5.4 实验结果
• 5.4.1 粒径及Zeta电位
• 5.4.2 载药对胰岛素PPLA纳米微球的影响
• 5.5 讨论
• 5.6 本章小结
• 6 结论与展望
• 6.1 主要结论
• 6.2 后续研究工作的展望
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 附录A 在攻读学位期间发表的论文目录
• 附录B 在攻读学位期间参与的科研项目