四个寻常性鱼鳞病家系致病基因的定位及FLG基因突变研究

论文摘要

寻常性鱼鳞病(Ichthyosis Vulgaris,Ⅳ)是遗传性皮肤病的一种常见类型,国际上报道其发病率在1:250至1:5300之间,中国人群发病率为0.23%。寻常性鱼鳞病通常在出生后一年内开始起病。其临床特征包括皮肤干燥,病人的四肢伸侧外表皮产生白色的鳞屑,躯干部也偶有出现,还包括掌跖线状皲裂和掌纹加深,遗传性过敏症和不耐热性。寻常性鱼鳞病遗传方式复杂,以常染色体显性遗传多见,存在遗传异质性。迄今为止,仅克隆了一个寻常性鱼鳞病的致病基因—filaggrin(FLG)。FLG基因突变导致的寻常性鱼鳞病呈常染色体半显性遗传,纯合突变或复合杂合突变所致的寻常性鱼鳞病症状较重,杂合突变所致的寻常性鱼鳞病症状较轻或无症状显现。我们收集了4个中国人群寻常性鱼鳞病家系,根据每个家系的特点,采取不同的方法进行研究,以期克隆这些家系的致病基因。对样本数较多的家系1,采用全基因组扫描和连锁分析的方法对其进行致病基因的定位。结果显示:该家系致病基因位点与遗传标记D1S498(1q21)连锁,在重组率θ=0时得到最大两点LOD值1.94(按18人计算)和2.84(按26人计算)。进一步的单体型分析将致病基因定位在D1S2612—D1S2635之间约9.7cM(11.4Mb)区域,该区间包括了FLG基因。根据家系1致病基因的定位及寻常性鱼鳞病致病基因的克隆情况,我们对这4个寻常性鱼鳞病家系进行FLG基因的突变检测,采用PCR扩增FLG基因的三个外显子,直接测序分析寻找突变。结果在家系1中检测到c.3321delA杂合突变,c.7945delA杂合突变和c.3321delA/c.7945delA复合杂合突变;家系2中检测到c.3321delA杂合突变和c.3321delA纯合突变;家系3中检测到c.3321delA杂合突变;家系4中未检测到FLG基因突变。此外,在180个家系外对照中检测到2个个体携带c.7945delA杂合突变。我们的研究结果显示:FLG基因突变导致家系1、家系2和家系3寻常性鱼鳞病的发生;家系4寻常性鱼鳞病的发生可能是由FLG基因非编码区突变或其它未知基因突变所导致。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 主要仪器、试剂与耗材
• 第一章 应用连锁分析对一个寻常性鱼鳞病家系的致病基因进行定位
• 1. 研究对象
• 2. 研究方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 第二章 对四个寻常性鱼鳞病家系进行FLG基因的突变研究
• 1. 研究对象
• 2. 研究方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间主要研究成果