WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移抑制作用的实验研究

WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移抑制作用的实验研究

论文摘要

目的研究WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移的抑制作用。方法脂质体介导WTp53基因,逆转录病毒载体基因转移系统介导TK、CD基因转染SW480细胞,G418筛选稳定转染的SW480/p53细胞、SW480/TK-CD细胞,RT-PCR鉴定目的基因整合表达。将48只裸鼠随机分为6组,脾内注射法建立结肠癌肝转移动物模型,第1组:脾内注射SW480细胞(对照组);第2组:脾内注射SW480/p53细胞;第3组:脾内注射SW480/TK-CD细胞,腹腔注射GCV;第4组:脾内注射SW480/TK-CD细胞,腹腔注射5-Fc;第5组:脾内注射SW480/TK-CD细胞,腹腔注射GCV、5-Fc;第6组:脾内注射SW480/p53与SW480/TK-CD等比例混合细胞,腹腔注射GCV、5-Fc。观察各组裸鼠的一般状况、肝转移率、肝转移瘤数目、常规病理、电镜下肿瘤组织病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数(AI)、生存期等指标。结果WTp53基因和TK、CD基因转染顺利,成功筛选出稳定转染SW480/p53和SW480/TK-CD细胞,RT-PCR分别显示546bp、1.19kb、1.31 kb的p53、TK、CD阳性条带。各治疗组裸鼠肝转移的发生率下降,平均肝转移瘤数减少,其动物的生存期延长,肝转移瘤内的癌细胞凋亡率增高。联合基因治疗组效果最好,且WTp53与TK/GCV、CD/5-Fc有交互协同作用。结论WTp53基因和TK/GCV、CD/5-Fc系统联合应用具有协同效应,可有效地抑制结肠癌肝转移的形成。

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