葡萄风信子离体繁殖与多倍体诱导研究

论文摘要

葡萄风信子（Muscari）属百合科蓝壶花属,是一种从欧洲引进的多年生草本球根花卉。其种类丰富,植株矮小花期早,开放时间长,花序以罕见的蓝色为主,是一种具有较高的观赏价值的观花地被。但其传统繁殖方法以分植鳞茎为主,繁殖率低并带病菌,使品种严重退化,鳞茎萎缩;并且其植株较矮小,花也较小,无法达到很好的观赏效果。因此,本着品种改良的目的,本试验在前人研究的基础上,对亚美尼亚葡萄风信子（M.armeniacum）进行了系统的组织培养研究,建立其再生体系,以期得到最佳的快速繁殖的途径,推进葡萄风信子离体培养的研究进展,为以后的良种繁育、遗传改良、遗传转化等研究工作奠定基础;同时在组织培养的基础上结合染色体工程技术,利用秋水仙素的两种培养方法对葡萄风信子进行多倍体诱导,试图研究出诱导多倍体新种质的技术和方法,为培育具有更高观赏价值的葡萄风信子新品种奠定基础。实验结果如下:1、葡萄风信子再生体系的研究本试验以亚美尼亚葡萄风信子的鳞茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度组合的生长素和细胞分裂素,进行愈伤组织的诱导、愈伤组织诱导不定芽、及生根诱导等研究,结果显示:鳞茎诱导愈伤组织的最适宜培养基为MS + 2,4-D 1.0 mg/L,诱导率为98.3%;诱导不定芽的最适宜培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L,分化率为100%;最适宜的生根培养基为1/2MS + IBA 1.0 mg/L,生根率为100%。2葡萄风信子多倍体的研究在组织培养的基础上,以愈伤组织作为诱导多倍体的试验材料,利用秋水仙素的混合培养法和浸泡培养法,比较不同浓度、不同处理时间对亚美尼亚葡萄风信子的诱变效果。结果表明,两种方法均能诱导出多倍体植株,但浸泡法比混培法的诱导率要高,相对的死亡率也较高。其中浸泡法以浓度为0.05%,时间为15h的处理组合多倍体诱导率最高,达到45.6%;混培法以浓度为0.05%,时间为15d的处理组合诱导率最高,为21.1%。经秋水仙素诱导的植株与正常二倍体植株比较,诱导变异植株叶片变厚变宽,叶色变深,鳞茎变大,气孔显著增大而单位面积气孔数减少,对诱导变异株进行细胞学观察后发现,对照二倍体植株2n=2x=18,变异株2n=4x=36,为四倍体,另外还发现嵌合体的存在。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 葡萄风信子的种质资源及研究进展
• 1.1.1 葡萄风信子的种质资源
• 1.1.2 葡萄风信子的研究进展
• 1.2 植物组织培养技术的发展及在花卉上的应用
• 1.2.1 植物组织培养技术的概念
• 1.2.2 植物组织培养中的形态发生
• 1.2.3 植物组织培养技术的发展
• 1.2.4 植物组织培养技术在花卉上的应用
• 1.2.4.1 花卉的快速繁殖
• 1.2.4.2 培育无病毒花卉
• 1.2.4.3 培育花卉新品种
• 1.2.4.4 保存花卉种质资源
• 1.2.4.5 产生次生代谢产物
• 1.3 园艺植物多倍体研究进展及鉴定方法
• 1.3.1 园艺植物多倍体研究进展
• 1.3.1.1 自然突变形成多倍体
• 1.3.1.2 人工诱导形成多倍体
• 1.3.2 园艺植物多倍体鉴定方法
• 1.4 植物组培与多倍体育种技术相结合的研究进展
• 1.5 本课题研究的目的意义及思路
• 1.5.1 目的和意义
• 1.5.2 实验思路
• 第二章 葡萄风信子离体快繁体系的建立
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 外植体材料的灭菌
• 2.2.2 葡萄风信子愈伤组织的诱导及增殖
• 2.2.3 葡萄风信子不定芽的诱导与继代培养
• 2.2.4 生根培养
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 愈伤组织的诱导
• 2.3.2 不定芽的诱导
• 2.3.3 根的诱导
• 2.4 小结
• 第三章 葡萄风信子多倍体的诱导及鉴定
• 3.1 试验材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 混合培养法
• 3.2.2 浸泡培养法
• 3.2.3 多倍体鉴定
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 混合培养法的诱导效果
• 3.3.2 浸泡培养法的诱导效果
• 3.3.3 多倍体的鉴定
• 3.4 小结
• 第四章 讨论与结论
• 4.1 讨论
• 4.1.1 离体快繁体系的建立
• 4.1.1.1 试验材料及方法的选择
• 4.1.1.2 试验中遇到的问题
• 4.1.2 多倍体的诱导及鉴定
• 4.1.2.1 秋水仙素的浓度和诱导时间
• 4.1.2.2 诱导材料的选择
• 4.1.2.3 试验中遇到的问题
• 4.2 结论
• 4.2.1 葡萄风信子离体快繁体系的建立
• 4.2.2 葡萄风信子多倍体的诱导及鉴定
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介