壮骨健膝颗粒防治膝骨性关节炎的药效学研究

论文摘要

目的:通过对壮骨健膝颗粒一般药效学的研究,及其对兔膝关节骨性关节炎模型（以下简称KOA）关节软骨病理形态、关节液中一氧化氮（nitric oxide,NO）、前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）含量和关节软骨中软骨细胞凋亡等多项指标影响的观察,探讨壮骨健膝颗粒防治KOA的疗效机理,为其中药新药申报打下基础。方法:1.采用醋酸致小鼠扭体法完成壮骨健膝颗粒镇痛的药效学研究。2.采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法完成壮骨健膝颗粒抗炎消肿的药效学研究。3.采用改良Hulth法复制兔膝骨性关节炎模型,研究壮骨健膝颗粒对KOA膝关节的组织形态学（滑膜和关节软骨）、关节液中NO、PGE2含量的影响;采用TUNEL法对关节软骨中的软骨细胞原位细胞凋亡进行检测,评价壮骨健膝颗粒对软骨细胞凋亡的影响。结果:1.壮骨健膝颗粒高、中、低剂量组和对照组均可明显减少小鼠扭体次数及延缓疼痛的产生（P＜0.01）,高、中剂量组与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）,而低剂量组与高、中剂量组相比有显著性差异（P＜0.05）。2.壮骨健膝颗粒高、中、低剂量组和对照组均可明显抑制小鼠耳肿胀度（P＜0.01）,高、中剂量组与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）,而低剂量组与高、中剂量组相比有显著性差异（P＜0.05）。3.病理结果:正常组的关节囊外观正常,关节面光滑,呈乳白色,色泽光亮,无裂纹及缺损,滑膜细胞排列整齐,间质无水肿,软骨细胞的排列与基质的分布规律,表层细胞成梭形,大致成水平排列,中间细胞圆形,散在分布,辐射层软骨细胞成柱状排列;模型组的关节囊增厚,关节面糜烂,色泽发白,有的还伴有软骨局部缺损,软骨边缘破坏,骨赘增生,滑膜下毛细血管增生,间质水肿,有少量淋巴细胞、浆细胞浸润,有散在出血,表层软骨变薄、粗糙,表浅层细胞消失,移行层细胞排列不规则,基质染色浅,深层可见细胞有簇集样增生现象,软骨四层结构不易分辨,潮线多不完整或可见双重潮线;对照组的关节面呈淡白色,表面尚光滑,但可见有散在的点状及条状凹陷,滑膜上皮少许增生肥大,间质水肿,有少量淋巴细胞浸润,表层软骨变薄,表面尚平整,偶见小的裂隙形成,表浅层细胞消失,放射层软骨细胞萎缩,细胞层次不清;中药低剂量组的关节表面欠光滑,股骨髁粗大,有少量骨赘生成,滑膜上皮轻度增生,间质有水肿,毛细血管增生,伴有少量淋巴细胞浸润,表面较光滑,表浅层细胞消失,放射层软骨细胞萎缩,细胞层次不清;中药中剂量组关节面尚光滑,可见有散在的点状凹陷,均未见明显的侵蚀性软骨缺损,滑膜细胞呈单层排列,上皮无增生,间质无水肿,有少量毛细血管增生,软骨细胞排列较整齐,软骨细胞核固缩,可见软骨细胞呈巢状增生;中药高剂量组则介于中药低、中剂量组之间,但较对照组退变轻。4.壮骨健膝颗粒高、中、低剂量组和对照组Markin’S评分分数与模型组比较有非常显著性降低差异（P＜0.01）,中剂量组与对照组比较有显著性差异（p＜0.05）。5.壮骨健膝颗粒高、中、低剂量实验组和对照组中NO、PGE2含量明显低于模型组（P＜0.05,P＜0.01）,而高、中剂量组与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）,而低剂量组与高、中剂量相比有显著性差异（P＜0.05）。6.软骨细胞凋亡指数检测结果示壮骨健膝颗粒高、中、低剂量组和对照组与模型组比较均有显著性差异（P＜0.01,P＜0.05）,而高、中、低剂量组与对照组比较有显著性差异（P＜0.05）,高、中剂量组与低剂量组比较有显著性差异（P＜0.05）。结论:壮骨健膝颗粒具有明显的抗炎消肿、镇痛作用,而且还能够减轻兔KOA模型的软骨退行性变和滑膜炎症,降低炎症介质的分泌,抑制膝骨性关节炎软骨细胞的凋亡,从而起到防治膝骨性关节炎的作用,其中壮骨健膝颗粒中、高剂量组疗效较好。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 实验一 镇痛药效研究——醋酸扭体实验
• 1 药物、试剂与器械
• 2 实验动物及方法
• 3 数据处理及统计方法
• 4 结果
• 实验二 抗炎消肿药效研究——二甲苯致耳廓肿胀实验
• 1 药物、试剂与器械
• 2 实验动物及方法
• 3 数据处理及统计方法
• 4 结果
• 实验三 对兔KOA模型影响的实验研究
• 一、兔ROA模型的建立及壮骨健膝颗粒对其组织形态学的影响
• 1 材料与试剂
• 2 实验方法
• 3 标本取材、制备及组织形态学观察
• 4 统计学处理
• 2含量的影响'>二、壮骨健膝颗粒对兔KOA模型关节液中NO、PGE₂含量的影响
• 1 材料与试剂
• 2 实验方法同实验三
• 3 标本取材
• 2的测定'>4 NO、PGE₂的测定
• 5 统计学处理
• 6 结果
• 三、壮骨健膝颗粒对兔KOA关节软骨软骨细胞凋亡的影响
• 1 材料与试剂
• 2 实验方法同实验三
• 3 标本制备
• 4 标本检测
• 5 统计分析
• 6 结果
• 讨论
• 结论
• 课题展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录图片
• 文献综述
• 作者简历