论文摘要
[目的]人Hedgehog信号通路中SHH-N重组表达和抗体制备,并应用于检测人胰腺癌组织中SHH的特异性表达。 [方法]从人胰腺癌细胞株SW1990中抽提出SHH-N末端基因,并将其插入原核表达载体pET22b中,转化E.coli BL21（DE3）,IPTG诱导SHH-N重组表达。重组蛋白SHH-N免疫KM小鼠制备抗SHH-N多克隆抗体,免疫印迹鉴定。并以其作为检测抗体免疫组化检测胰腺癌组织SHH表达。 [结果] 成功构建了重组质粒并诱导表达目的蛋白。pET22b-SHH-N制备出高效价的SHH多克隆抗体,并经Western免疫印迹鉴定特异性高。免疫组化检测胰腺癌等标本,染色效果特异。 [结论] 本研究获得SHH-N重组蛋白和SHH-N多克隆抗体制备的基因工程方法。为进一步研究Hedgehog信号通路在胰腺癌中的发病机制及胰腺癌诊断提供了重要实验材料。
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