肺表面活性物质在急性肺损伤大鼠早期的变化及β受体激动剂的干预作用

论文摘要

目的学习掌握油酸（oleic acid, OA）静脉注射复制大鼠急性肺损伤（acute lunginjury, ALI）模型的方法;探讨肺表面活性物质（pulmonary surfactant, PS）系统在急性油酸性肺损伤时的变化规律及其作用机制,β肾上腺素能受体（ beta-adrenergic receptor, β-AR ） 激动剂—盐酸异丙肾上腺素（Isoprenaline hydrochloride）对OA 致ALI 大鼠的防治作用及其可能的作用机制,为临床治疗ALI 开辟新的治疗措施提供理论依据和实践方向。方法应用OA 静脉注射复制大鼠ALI 模型。将78 只SD 大鼠随机分3 组:生理盐水对照组（NS 组）、油酸致急性肺损伤组（OA 组）、盐酸异丙肾上腺素治疗组（I&O组）。分别观察1 小时、2 小时和4 小时后取血并快速处死,测定动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、pH 值及血清肺表面活性物质相关蛋白A（surfactant associated protein A,SP-A）。右肺灌洗后,测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总蛋白（total proteins,TP）、总磷脂（total phospholipids,TPL）、磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine,PC）和SP-A 浓度;测左肺上段湿/干重比（wet / dry weight,W/D 值）,左肺中段作细胞膜β-AR 的放射性配基结合分析,左肺下叶行病理检查。结果与NS组比较,OA组各时间点BALF中TPL、PC/TPL和SP-A明显减少（P<0.01）,而TP、W/D 值及血清SP-A 显著升高（P<0.05）,肺组织β-AR 明显下降（P<0.01）,肺病理见明显ALI 表现;且OA 组各时间点血清SP-A 与同组BALF 中SP-A 呈负相关(rOA1= -0.914,P<0.05;rOA2= -0.923,P<0.01;rOA4= -0.910,P<0.05)。I&O组BALF 中TPL、PC/TPL 和SP-A 较OA 组相同时间点明显上升（P<0.05）,而TP、W/D 值及血清SP-A 显著降低（P<0.05）,肺组织β-AR 无显著性差异（P>0.05）,肺病理表现明显好转。

论文目录

• 第一章 引言
• 1.1 栖热菌
• 1.1.1 栖热菌种群的发现及鉴定
• 1.1.2 栖热菌耐高温酶
• 1.2 普鲁兰酶的种类及研究现状
• 1.2.1 普鲁兰酶的种类
• 1.2.2 微生物普鲁兰酶
• 1.2.3 栖热菌普鲁兰酶
• 1.2.4 异淀粉酶
• 第二章 云南热泉栖热菌普鲁兰酶菌株筛选
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料与试剂
• 2.1.2 实验仪器
• 2.1.3 培养基
• 2.1.3.1 环境样品分离培养基
• 2.1.3.2 MD液体培养基
• 2.1.3.3 保藏培养基
• 2.1.4 菌种的分离和保藏方法
• 2.1.5 产普鲁兰酶菌株初筛
• 2.1.6 普鲁兰酶产生菌复筛
• 2.1.6.1 普鲁兰酶检测
• 2.1.6.2 α-淀粉酶检测
• 2.1.6.3 β-淀粉酶检测
• 2.1.6.4.异淀粉酶检测
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 温泉样品中疑似菌株的分离纯化结果
• 2.2.2 普鲁兰酶平板初筛结果
• 2.2.3 普鲁兰酶复筛
• 2.2.3.1 非芽孢菌普鲁兰酶活力检测
• 2.2.3.2 疑似菌株普鲁兰酶活力检测结果分析
• 2.2.3.3 疑似菌株其它淀粉酶活力检测
• 2.2.3.3.1 α—淀粉酶检测及标准曲线
• 2.2.3.3.2 β—淀粉酶检测及标准曲线
• 2.2.3.2.3 异淀粉酶检测及标准曲线
• 2.2.3.4 疑似菌株其它淀粉酶检测结果
• 2.2.3.5 检测结果讨论
• 2.3 小结
• 第三章 云南热泉高温菌WQBGR2-3菌株高产热稳定性普鲁兰酶诱导及发酵条件优化
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料和仪器
• 3.2.2 培养基
• 3.2.3 实验方法
• 3.2.3.1 WQBGR2-3普鲁兰酶诱导实验
• 3.2.3.2 生长曲线与生长过程中普鲁兰酶的积累
• 3.2.3.3 优化试验前的单因素实验
• 3.2.3.4 二次正交组合响应表面实验设计
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 诱导实验结果分析
• 3.3.2 生长曲线及酶活力曲线测定结果
• 3.3.3 优化实验的单因素实验结果
• 3.3.4 二次三因素实验结果
• 3.3.5 实验过程中其它问题分析
• 3.4 小结
• 第四章 云南热泉高温菌WQBGR2-3的普鲁兰酶分离纯化及酶学性质的初步研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.1.1 菌种
• 4.1.1.2 试剂与仪器
• 4.1.2 实验原理与方法
• 4.1.2.1 丙酮沉淀
• 4.1.2.2 鞣酸沉淀
• 4.1.2.3 凝胶层析
• 4.1.2.4 酶的pH、温度曲线及酶的热稳定性研究
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 丙酮沉淀过程的监测及结果分析
• 4.2.2 鞣酸沉淀结果分析
• 4.2.3 凝胶层析分离蛋白质及结果分析
• 4.2.4 酶的pH、温度曲线及热稳定性研究结果
• 4.3 小结
• 第五章 菌株WQBGR2-3的生理生化试验及初步鉴定
• 5.1 所需仪器试剂
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 菌落形态观察
• 5.2.2 WQBGR2-3的生理生化实验
• 5.2.2.1 过氧化氢酶实验
• 5.2.2.2 动力实验
• 5.2.2.3 淀粉水解实验
• 5.3 结果与讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录及附表