乙肝病毒表面抗原在人参细胞中的表达

乙肝病毒表面抗原在人参细胞中的表达

论文摘要

乙型肝炎是目前我国流行最广泛、危害最严重的传染病之一。目前全球乙肝携带者大约有3.5亿人,而我国乙肝携带者就有1.2亿以上。由于没有治疗乙肝的特效药物,所以控制乙肝病毒感染及传播的有效措施是接种乙肝疫苗。随着乙型肝炎病毒基因组全序列的测定,乙肝病毒表面抗原(HBsAg)基因已相继在大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞和昆虫杆状病毒体系中表达。其中产业化的有酵母和CHO系统两种。尽管多种系统都能表达HBsAg,但由于价格因素,仍不能普及使用。因此人们探索用植物细胞表达HBsAg,希望获得更加低廉、高效的疫苗。本研究构建了携带HBsAg基因的植物细胞表达载体,采用农杆菌感染方法将其整合到人参细胞的染色体上,得到了能够表达HBsAg的人参细胞系(CS83),并进行了免疫学特异性检测。转基因植物组织细胞作为生物反应器具有广阔的应用前景。本研究为利用植物组织培养技术表达和生产医用重组蛋白提供了技术平台,为其它珍稀药用植物的开发利用、组织培养及表达重组蛋白奠定了坚实基础。

论文目录

  • 内容提要
  • 第一章 前言
  • 1.1 乙型肝炎相关背景
  • 1.2 乙型肝炎疫苗的研究
  • 1.3 人参细胞的培养
  • 1.4 植物基因工程医药研究进展
  • 1.5 本课题的立题依据
  • 1.6 实验思路与方案
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 材料、 仪器和试剂
  • 2.2 方法
  • 第三章 结果与讨论
  • 3.1 PCR 扩增HBsAg 基因电泳结果
  • 3.2 克隆载体的鉴定
  • 3.3 表达载体的鉴定
  • 3.4 转基因细胞的筛选、鉴定
  • 3.5 ELISA 法测定HBsAg 蛋白表达
  • 3.6 免疫组织化学实验
  • 3.7 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • Abstract
  • 致谢
  • 相关论文文献

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