论文摘要
目的:观察姜黄素对肝源性HepG2细胞胰岛素抵抗（Insulin resistance,IR）的影响及分子机制。方法:采用高浓度胰岛素诱导肝源性HepG2细胞产生胰岛素抵抗,建立胰岛素抵抗细胞（Insulin-resistant HepG2,HepG2/IR）模型,分别设立对照组（HepG2细胞）、模型组（HepG2/IR）、吡格列酮组（10μmol/L）、姜黄素（2.5、5、10、15、20μmol/L）组;以葡萄糖过氧化物酶（GOD-POD）法测定葡萄糖消耗量,过碘酸—Schiff染色（PAS）法检测细胞内糖原并用数字图像分析其光密度,流式细胞术（FCM）检测胰岛素受体（Insulin receptor,InsR）和葡萄糖转运蛋白-2（Glucose transporter-2,GLUT-2）表达水平,RT-PCR检测InsR和GLUT-2基因mRNA表达水平。结果:HepG2细胞经10-6mol/L胰岛素孵育60h后,与对照组相比HepG2/IR细胞葡萄糖消耗量较HepG2降低58.33%（P＜0.05）;PAS染色光密度分析细胞内糖元含量降低70.91%（P＜0.01）;InsR蛋白和mRNA表达下降71.43%和57.00%（P＜0.05）,GLUT-2的蛋白和mRNA表达升高了41.00%和95.91%（P＜0.01）;显示已建立了胰岛素抵抗模型。5μmol/L和20μmol/L姜黄素处理组与HepG2/IR组比较,葡萄糖消耗量增加了12.33%和37.74%（P＜0.05）,细胞内糖原增加37.31%和101.49%（P＜0.05）;HepG2/IR细胞InsR蛋白和基因表达上调了35.26%和100.64%及24.41%和44.35%（P＜0.05）,GLUT-2的蛋白和基因表达降低了5.00%和25.60%及7.96%和24.99%（P＜0.05）。结论:胰岛素诱导肝源性细胞HepG2细胞后发生胰岛素抵抗,其胰岛素受体蛋白及mRNA表达量降低和GLUT-2蛋白及mRNA的表达升高。姜黄素上调HepG2/IR细胞胰岛素受体蛋白及mRNA表达和下调HepG2/IR细胞GLUT-2蛋白及mRNA表达而改善HepG2/IR细胞胰岛素抵抗状态。
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