半乳糖—聚乙二醇—聚-L-赖氨酸/质粒pEGFP-C1复合物纳米胶束的制备和性能研究

论文摘要

肝脏是人体最大的消化腺,也是机体不可或缺的代谢中心,与人类许多遗传性疾病、代谢性疾病、肿瘤密切相关。以肝癌为例,它对化疗和放疗均不敏感,能手术根治仅占15 % ,其他的治疗效果也不理想。因此近几年随着分子生物学技术的不断发展和人们对肝病发病机制的不断认识,人们将基因治疗引入各类肝病的治疗中。基因治疗是一种将外源基因导入目的细胞并有效表达,从而达到治病目的的治疗方法。在基因治疗中,体外DNA进入细胞的有效传递是极其关键的一步。目前临床试验中所用的载体一般有两类:病毒载体和非病毒载体。为了避免病毒载体系统可能引起的安全问题,非病毒载体系统传递DNA进入细胞是一种具有吸引力的替代方法,从而对非病毒载体系统的研究也日益增加,例如阳离子脂质体/DNA复合物和聚合物/DNA复合物。脂质体、聚阳离子作为非病毒载体,由于具有安全性和价格低廉的优点,近十年来已被广泛的研究。尽管有报道脂质体基因载体在体外有较高的转染率,但一些脂质体基因载体在水溶液中不稳定,在血中聚集。聚阳离子包括聚赖氨酸(PLL)和聚乙烯亚胺(PEI),二者能浓缩质粒DNA而免遭酶的降解,从而增强了转染率。然而,这仍然存在着一些缺点,例如在体内的生物相容性。为克服这些生物相容性问题,无毒性可生物降解的聚合物基因载体作为有前景的基因

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 非病毒基因载体的研究
• 1.1.1 裸DNA
• 1.1.2 阳离子脂质体
• 1.1.3 阳离子聚合物
• 1.2 肝靶向性基因治疗的研究
• 1.3 嵌段共聚物的研究
• 1.3.1 嵌段共聚物胶束的特点
• 1.3.2 嵌段共聚物胶束的组分和形成
• 1.3.3 嵌段共聚物/药物胶束的制备方法
• 1.4 本研究的目的、意义和内容
• 第二章 聚-L-赖氨酸的合成与表征
• 2.1 试剂和仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 表征
• 2.4 结果与讨论
• 2.5 结论
• 第三章 聚乙二醇单甲醚-聚-L-赖氨酸嵌段共聚物的合成及其表征
• 3.1 试剂和仪器
• 3.2 实验方法
• 3.3 分析检测
• 3.4 结果与讨论
• 3.5 结论
• 第四章 半乳糖-聚乙二醇-聚-L-赖氨酸共聚物的制备与分析
• 4.1 试剂与仪器
• 4.2 试验方法
• 4.3 结构检测
• 4.4 结果与讨论
• 4.5 本章小结
• 第五章 聚合物的生物降解性评价
• 5.1 实验部分
• 5.2 结果和讨论
• 5.3 本章小结
• 第六章 聚合物的细胞毒性试验
• 6.1 材料和仪器
• 6.2 实验方法
• 6.3 结果
• 6.4 讨论
• 6.4.1 细胞的选择
• 6.4.2 MTT 比色法
• 6.4.3 阳离子聚合物的细胞毒性
• 6.5 本章小结
• 第七章 不同聚合物/质粒pEGFP-C1 复合物的自组装
• 7.1 材料和仪器
• 7.2 实验方法
• 7.3 结果
• 7.4 讨论
• 7.5 本章小结
• 第八章 聚合物载体/质粒pEGFP-C1 复合物的性能研究
• 8.1 材料和仪器
• 8.2 实验方法
• 8.3 结果
• 8.4 讨论
• 8.5 本章小结
• 第九章 聚合物/质粒pEGFP-C1 复合物的细胞转染试验
• 9.1 材料和仪器
• 9.2 实验方法
• 9.3 结果
• 9.4 讨论
• 9.5 本章小结
• 结论
• 本研究的特色和创新之处
• 攻读博士学位期间发表的论文
• 参考文献
• 致谢
• 原创性声明