论文摘要
目的观察体外培养的大鼠颅骨成骨细胞，在不同强度静磁场作用下，不同时间点细胞的增殖情况，并进一步研究在适宜强度静磁场作用下，细胞内钙离子浓度的变化，以期进一步探讨静磁场在促成骨细胞增殖中可能的作用机制。方法1、细胞培养原代培养大鼠颅骨成骨细胞，并进行细胞的形态观察，用碱性磷酸酶染色和钙结节染色法作细胞鉴定。2、MTT法检测成骨细胞增殖率检测成骨细胞在0Gs、260Gs、440Gs、900Gs的磁场强度作用下，24h、48h、72h的增殖率，每组取测得结果的平均值作为最终结果。3、荧光测钙选用440Gs强度的静磁场，利用数字化荧光显微镜系统和荧光双波长分光光度计观察和测定钙离子在细胞内的分布及浓度变化，其中钙离子浓度值参照特定公式进行计算后各组取平均值。4、统计学分析采用SPSS for Windows 11.0统计分析软件对结果进行分析。单因素方差分析（ANOVA）用于比较成骨细胞增殖率，Dunnett-t检验用于比较成骨细胞内钙离子浓度值。显著性水平定为：P＜0.05时有显著性差异，P＜0.01时有高度显著性差异。结果1、细胞培养原代培养的成骨细胞，贴壁生长，形态呈梭形、三角形或多角形，碱性磷酸酶染色和钙结节染色呈阳性着色。2、MTT方法检测只有磁场强度为440Gs时，成骨细胞在48h内，出现明显增殖（P＜0.01）。静磁场作用72h时检测，440Gs组和900Gs组经统计分析与0Gs之间存在高度显著性差异（P＜0.01）。3、荧光测钙数字化荧光显微镜系统观察，静磁场作用前后胞内钙离子荧光强度基本没有变化，成骨细胞中部层面内，荧光信号较强，细胞核内荧光信号最强，且在同一层面内钙荧光信号强度不均匀。成骨细胞在静磁场作用5min、10min时，钙离子浓度与对照组比较无显著性差异，作用15min时，经统计分析与对照组之间存在高度显著性差异（P＜0.01）。结论1、静磁场能促进成骨细胞的增殖，并可能存在一定的强度依赖性。2、一定强度的静磁场促进成骨细胞的增殖存在时间依赖性。3、一定强度的静磁场对成骨细胞内钙离子浓度不存在瞬时作用。4、一定强度的静磁场能使成骨细胞内钙离子浓度升高，并存在一定的时间依赖性。