论文摘要
目的:探讨阿奇霉素（AZT）通过基质金属蛋白酶9（MMP9）抑制气道黏液高分泌的作用机制。方法（1）培养人支气管上皮细胞株HBE16细胞,以中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）为刺激物,AZT和表皮生长因子受体（EGFR）拮抗剂BIBX1522为干扰因素,将细胞分为对照组、NE刺激组、AZT干预+NE刺激组和BIBX1522干预+NE刺激组。运用Western blot检测细胞中MMP9、TIMP-1和pro-MMP9蛋白含量;明胶酶谱法检测培养细胞内MMP9活性。（2）运用RT-PCR检测各组细胞中MMP9 mRNA ;Western blot法检测细胞中p-EGFR和p-ERK。（3）ELISA检测培养细胞上清液中的MUC5AC蛋白含量;用RT-PCR检测细胞内MUC5AC mRNA。结果（1）与对照组相比,NE刺激组中MMP9的蛋白表达水平、MMP9的活性指标升高（均P<0.01）,而pro-MMP9蛋白含量降低（P<0.01）,TIMP-1含量未见明显改变;与NE刺激组相比,AZT干预+NE刺激组中MMP9的蛋白表达水平与MMP9活性降低（均P<0.01）,pro-MMP9和TIMP-1蛋白含量升高（均P<0.05）;与NE刺激组相比,BIBX1522干预+NE刺激组中各项检验指标无明显改变,差异无统计学意义。（2）同对照组比较,NE刺激组中MMP9的基因转录明显升高（P<0.01）,p-EGFR和p-ERK的蛋白表达水平升高（均P<0.01）;与NE刺激组比较,AZT干预+NE刺激组中MMP9的基因转录水平明显降低（P<0.01）,p-EGFR的蛋白表达未见明显降低,而p-ERK蛋白表达水平降低了（P<0.01）;同NE刺激组相比,BIBX1522干预+NE刺激组中MMP9 mRNA、p-EGFR和p-ERK明显降低（均P<0.01）。（3）和对照组相比,NE刺激组中MUC5AC的基因转录和蛋白表达水平明显升高（均P<0.01）;与NE刺激组相比,AZT干预+NE刺激组中MUC5AC基因转录与蛋白表达水平明显降低（均P<0.01）;跟NE刺激组相比,BIBX1522干预+NE刺激组MUC5AC mRNA明显降低（P<0.01）,MUC5AC蛋白表达水平无明显改变,差异无统计学意义。结论（1）AZT可抑制气道上皮细胞内NE刺激的pro-MMP9活化,并增加MMP9抑制因子TIMP-1的表达,从而抑制MMP9的活性。（2）AZT能调控EGFR/ERK1/2信号通路,抑制额外的MMP9的产生。（3）AZT具有抑制气道黏液高分泌的作用。