血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞的调节作用 ——基于对分泌TGF-β1和LN的影响

论文摘要

目的:探讨血府逐瘀汤对糖尿病肾病的作用及机制。方法:借助肾小球MC体外培养技术,采用血清药理学方法,对高糖培养人肾小球系膜细胞进行血府逐瘀汤干预试验,观察其对人肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）的影响。健康志愿者7人,年龄、体重均接近,给予血府逐瘀汤口服,制备含药血清。正常人血清采自健康志愿者未服药前（前后对照）。实验分为七组,分别为对照组（第A组）、高糖培养组（第B组）、高糖加正常人血清组（第C组）、高糖加含中药低浓度血清组（第D组）、高糖加含中药中浓度血清组（第E组）、高糖加含中药高浓度血清组（第F组）、高糖加辛伐他汀组（第G组）,分别给予各组培养液,分别培养24、48、72h提取培养液上清,-20℃保存备用。采用双抗夹心ELISA法测定转化生长因子β1（TGF-β1）含量。采用RIA法测定层粘连蛋白（LN）含量。并计算24小时抑制率。结果:与第A组相比,第B组系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）增加（P＜0.01）;与第B组相比,第C组系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）未受到抑制（P＞0.05）;与第B组相比,第D、E、F组的系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）均受到抑制（P＜0.01）,并呈剂量依赖性,与第B组相比,第G组的系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）亦受到抑制（P＜0.01）;第E组对于系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）的抑制与第G组相比无明显差异（P＞0.05）。结论:（1）肾小球系膜细胞（MC）可能是血府逐瘀汤发挥治疗作用的重要靶细胞,这可能是该方防治糖尿病肾病的机制之一。（2）不同浓度的血府逐瘀汤可抑制体外高糖环境下培养的MC分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）,且呈剂量依赖性。（3）血府逐瘀汤抑制肾小球系膜细胞分泌转化生长因子β1（TGF-β1）及层粘连蛋白（LN）,可能是该方能够明显抑制高糖培养的人肾小球系膜细胞（MC）分泌细胞因子及细胞外基质（ECM）的部分作用机理。

论文目录

• 缩略词表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 综述
• （一）TGF-β1与糖尿病肾病关系及中医药研究进展
• 1.TGF-β1在DN发病中的作用
• 2.DN时TGF-β1的变化
• 3.中医药在DN中拮抗TGF-β1研究的进展
• 4.展望
• （二）层粘连蛋白（LN）与糖尿病肾病关系的探讨
• 1、层粘连蛋白（LN）简介及作用
• 2.层粘连蛋白（LN）与糖尿病肾病关系
• 3.小结
• （三）中医对糖尿病肾病血瘀证的认识
• 1.古代医家对病因病机的认识
• 2.现代医家对DN病因病机的认识
• 材料与方法
• 1.材料
• 2.方法
• 结果
• 一、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞活力的影响
• 二、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞产生转化生长因子β1（TGF-β1）的影响
• 三、血府逐瘀汤对高糖培养下人肾小球系膜细胞分泌层粘连蛋白（LN）的影响
• 讨论
• （一）糖尿病肾病时TGF-β1及LN的变化及血府逐瘀汤的干预作用
• （二）血府逐瘀汤的组方特点及对糖尿病肾病的作用
• （三）系膜细胞在糖尿病肾病发生发展中的作用
• （四）中药血清药理学方法应用于肾小球系膜细胞研究的优势
• （五）血府逐瘀汤治疗糖尿病肾病存在的问题及展望
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士期间发表过的论文
• 个人简历