视网膜新生血管形成机制与防治的实验研究

论文摘要

[目的]：研究氧诱导的视网膜新生血管形成的机制及防治方法。[方法]：20只新生C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组,各10只。实验组P7置75%氧浓度环境中,P12返回正常空气中,对照组始终置于正常空气环境中,P17行荧光素灌注造影、视网膜铺片及病理切片,观察视网膜新生血管生成情况；幼鼠P12、P14、P17对照组和实验组各6只,取视网膜,应用realtime-PCR定量检测各时间点Annexin A2mRNA和TPAmRNA水平；HSS治疗组10只OIR模型小鼠腹腔注射饱和氢盐水、HSS对照组10只OIR模型小鼠腹腔注射生理盐水,正常组10只小鼠分别于P17用高分子量荧光素灌注造影观察血管分布与形态,HE染色计数突破内界膜的血管内皮细胞核数,用realtime-PCR和免疫组化检测视网膜VEGF表达,并测定丙二醛含量。[结果]：1.荧光素灌注造影结果显示实验组小鼠视网膜中央呈无灌注区域,视网膜血管迂曲扩张、荧光素渗漏,对照组小鼠视网膜血管分布均匀,未见无灌注区和荧光素渗漏；病理切片可见实验组小鼠突破内界膜的血管内皮细胞核数为79.70±7.57,对照组为0.28±0.12,两组具有显著差异（P<0.01）。2.P12和P17时,实验组与对照组Annexin A2mRNA和TPA mRNA的表达量无显著差异（P>0.05）；P14时,实验组Annexin A2mRNA和TPA mRNA表达量均比对照组高,且具有显著差异（P<0.01）。3.HSS治疗组荧光素灌注造影未见无灌注区、新生血管丛及荧光素渗漏；HSS对照组荧光素灌注造影视网膜视乳头周边可见大片无灌注区,视网膜血管不规则扩、迂曲,无灌注区周围可见大量新生血管丛,伴明显荧光素渗漏；正常组荧光素灌注造影视网膜未见无灌注区及荧光素渗漏。病理切片结果显示HSS治疗组、HSS对照组和正常组突破内界膜的血管内皮细胞核数分别为41.00±8.01、79.70±7.57和0.90±1.28,HSS治疗组与正常组无统计学差异（P>0.05）,HSS治疗组与HSS对照组具有显著差异（P<0.01）；免疫组织化学实验显示VEGF表达于神经节细胞层、内核层和色素上皮细胞层,VEGF蛋白阳性表达HSS治疗组、HSS对照组和正常组分别为1.46±0.01、2.92±0.70和1.30±0.06；HSS治疗组、HSS对照组和正常组VEGFmRNA表达量分别为1.94±0.12、7.40±0.04和1.00±0.03,HSS治疗组与正常组之间无统计学意义（P>0.05）,HSS治疗组与HSS对照组有显著性差异（P<0.01）；小鼠视网膜中MDA含量HSS治疗组为16.07±1.05 nmol/mg prot, HSS对照组为22.42±2.24 nmol/mg prot,正常组为5.17±4.23 nmol/mg prot, HSS治疗组与HSS对照组具有显著差异（P<0.01）,正常组与HSS对照组有显著差别（P<0.01）。[结论]：氧诱导视网膜新生血管小鼠模型稳定、可靠、重复性高,可做为研究视网膜新生血管疾病发病机制和防治方法的动物模型；Annexin A2和TPA与氧诱导视网膜新生血管的形成密切相关；饱和氢盐水对氧诱导的视网膜新生血管的形成有抑制作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 第一部分 氧诱导视网膜新生血管动物模型的建立
• 目的
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 Annexin A2与TPA在氧诱导视网膜新生血管中的表达
• 目的
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第三部分 饱和氢盐水抑制氧诱导视网膜新生血管的实验研究
• 目的
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 附录
• 参考文献
• 总结
• 综述
• Annexin A2与新生血管形成的研究进展
• 饱和氢盐水的研究进展
• 在读期间发表论文情况
• 致谢