北青龙衣细胞毒活性部位谱效关系的研究

论文摘要

本论文以北青龙衣,即胡桃科植物胡桃楸Juglans mandshurica Maxim.的新鲜未成熟果实为研究对象,以人结肠癌细胞LS-174T为药效模型,采用MTT法进行活性部位的筛选,构建北青龙衣细胞毒活性部位的指纹图谱。在建立化学成分指纹图谱和获得细胞毒活性测定结果的基础上,采用多元线性回归法中的逐步回归法,寻找北青龙衣“化学谱”与“药效”之间的对应关系。实验采用95%乙醇冷浸提取的方法,利用大孔树脂柱色谱技术、硅胶柱色谱技术、萃取的方法进行分离,采用MTT法,以人结肠癌细胞LS-174T为模型,对分离得到的部位进行活性跟踪筛选,确定北青龙衣细胞毒活性部位为乙酸乙酯部位。以高效液相色谱法建立北青龙衣细胞毒活性部位的指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似性评价软件,对10批不同来源的北青龙衣药材进行了相似度评价,并用聚类分析法对均数化的色谱峰峰面积进行了归类。最后,将指纹图谱中量化（均数化）的特征峰数据,与MTT法测得的北青龙衣药材细胞毒活性的结果相结合,采用多元线性回归中的逐步法构建北青龙衣药材的细胞毒活性的“谱-效”关系。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 北青龙衣的研究概述
• 1.1.1 北青龙衣的植物学研究
• 1.1.2 化学成分研究
• 1.1.3 药理活性研究
• 1.2 中药指纹图谱的研究概述
• 1.2.1 中药指纹图谱的发展
• 1.2.2 中药指纹图谱的分类
• 1.2.3 中药指纹图谱的评价模式
• 1.2.4 中药色谱指纹图谱在中药质量评价中的应用
• 1.3 中药谱效关系学研究进展
• 1.3.1 谱效关系研究思路与进展
• 1.3.2 当前常见的建立“谱效关系”的方法
• 1.3.3 建立在谱效关系基础上的药效物质基础研究
• 1.3.4 结语
• 第2章 北青龙衣细胞毒活性部位的提取与分离
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 药材
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 北青龙衣药材细胞毒活性部位的筛选
• 2.2.2 北青龙衣药材细胞毒活性部位的制备
• 2.2.3 活性部位筛选的细胞毒实验方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 2.5 本章小结
• 第3章 北青龙衣细胞毒活性部位HPLC 化学指纹图谱研究
• 3.1 实验材料
• 3.1.1 药品与试剂
• 3.1.2 药材来源
• 3.1.3 仪器
• 3.1.4 供试品溶液的制备
• 3.2 方法和结果
• 3.2.1 色谱条件的确定
• 3.2.2 HPLC 指纹图谱方法学考察
• 3.2.3 指纹图谱的建立
• 3.2.4 HPLC 指纹图谱的评价
• 3.2.5 HPLC 量化特征峰数据
• 3.3 讨论
• 第4章 10 批北青龙衣药材细胞毒活性的测定
• 4.1 实验材料
• 4.1.1 实验所用细胞株
• 4.1.2 主要药物
• 4.1.3 试剂
• 4.1.4 主要仪器
• 4.1.5 样品溶液的制备
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 细胞的培养、冻存与复苏
• 4.2.2 采用MTT 法检测细胞增殖抑制
• 4.3 实验结果
• 4.3.1 MTT 测细胞增殖抑制率的结果
• 4.3.2 MTT 测细胞增殖IC50 的结果
• 4.4 讨论
• 第5章 北青龙衣细胞毒活性谱效关系的研究
• 5.1 实验材料
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 方程的建立
• 5.2.2 建立北青龙衣细胞毒活性的谱效关系
• 5.3 实验结果
• 5.3.1 方程的建立
• 5.3.2 北青龙衣细胞毒活性的谱效关系
• 5.4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的学术成果