肾癌Endostatin、VEGF和bFGF的表达及其与肿瘤微血管密度的相关性研究

论文摘要

目的肾癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一,发病率占全身恶性肿瘤的3%,仅次于膀胱癌,居泌尿系肿瘤第二位。肾癌的发病率和死亡率在过去的50年中持续上升。患者初诊时约45%已有肿瘤转移,50%的肾癌患者术后有肿瘤复发。多年来应用分子免疫、基因治疗以及抗肿瘤血管形成的分子靶向治疗,对晚期或转移性肾癌已取得令人满意的疗效。在肿瘤研究中,大量的肿瘤相关因子表现出良好的应用前景,包括肿瘤细胞增殖相关因子、生长因子等。血管生成（Angiogenesis）是新血管从业已存在的成熟血管网中的穿生,对实体肿瘤的生长和转移起关键作用。肾癌是一种高度血管化肿瘤,研究证实其可以在体内外高表达血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）。内皮抑素（Endostatin）是一种内源性血管生成抑制因子,能特异抑制血管内皮细胞增殖和血管生成,其抗肿瘤活性在小鼠肿瘤模型得到证实。本实验目的是研究抑制和促进血管生成的调控因子,包括Endostatin、VEGF和bFGF在肾癌发病中的作用及其之间的相关性,为肾癌的生物学治疗提供理论依据。对象和方法本研究所用病例取自天津市泌尿外科研究所,天津医科大学第二医院2005年1月～2007年10月手术切除肾细胞癌组织标本且临床资料齐备者50例。男26例,女24例;年龄37～78岁,平均年龄62.7岁。按WHO分级标准,G115例,G224例,G311例。采用Robson分期,Ⅰ期14例,Ⅱ期21例,Ⅲ10例,Ⅳ期5例。另取肿瘤旁＞2cm区域的正常肾组织30例作为正常对照组。所有染色切片均由两位富有经验的病理医生在同一条件下用Olympus光学显微镜采用双盲法阅片。Endostatin、VEGF及bFGF蛋白阳性为肿瘤细胞胞浆表达棕黄色颗粒。为精确判断蛋白的表达程度及减少假阳性率,记分标准参照许良中等的方法,随机选择10个高倍视野共记录1000个肾癌细胞,根据细胞浆的着色程度及着色细胞的百分率进行评分计算阳性系数。肿瘤微血管密度（MVD）检测,在低倍光镜（×100）下浏览整个切片视野,选取血管密度最高的区域,然后转换高倍镜（×200）对该视野进行仔细观察计数。同法顺序计数多个高倍镜视野（HPF）,取平均值,最终结果表示为每高倍视野平均微血管数。统计软件采用SPSS13.0软件包。计量资料以（?）±s表示,计数资料以率或百分比表示,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果（1）Endostatin蛋白在癌旁正常肾脏组织中的表达率为36.7%,在肾癌组织中为76%,在肾癌组织中的表达强度显著高于癌旁正常肾脏组织（x2=14.892,P＜0.01）。Endostatin蛋白表达水平在Ⅲ～Ⅳ期的病例中呈高表达,与Ⅰ～Ⅱ期的病例比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）VEGF蛋白在癌旁正常肾脏组织中的表达率为20%,在肾癌组织中为74%,在肾癌组织中VEGF的表达强度显著高于癌旁正常肾脏组织（x2=23.636,P＜0.01）。VEGF蛋白表达水平在高分期,有肿瘤转移的病例中呈高表达,与低分期,无肿瘤转移的病例比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）在癌旁正常肾组织检测到bFGF呈弱阳性表达,表达率为23.3%,在肾癌组织中,表达率为68%。在肾癌组织中的表达强度显著高于癌旁正常肾脏组织（x2=16.426,P＜0.01）。bFGF蛋白表达水平在高分期,有肿瘤转移的病例中呈高表达,与低分期,无肿瘤转移的病例比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）肾癌组织中的MVD均值为（35.62±11.38）,明显高于癌旁正常肾脏组织（18.71±9.53）（t=6.824,P＜0.01）。分期Ⅲ～Ⅳ期MVD（41.29±10.65）显著高于Ⅰ～Ⅱ期（24.74±7.83）（P＜0.01）;MVD在组织学分级之间差异有统计学意义（P＜0.01）。（5）Endostatin、VEGF、bFGF及MVD在肾癌组织中表达的相互关系显示,Endostatin与MVD的表达具有相关性（P＜0.05）,VEGF与MVD的表达,bFGF与MVD的表达具有显著相关性（P＜0.01）;Endostatin与VEGF的表达,Endostatin与bFGF的表达及VEGF与bFGF的表达均具有显著相关性（P＜0.01）。结论（1）研究发现Endostatin、VEGF、bFGF、MVD在肾癌中表达显著高于癌旁的正常肾脏组织。（2）肾癌Endostatin、VEGF、bFGF表达与MVD有显著相关性,证实Endostatin、VEGF、bFGF是肾癌血管生成的关键调控因子。（3）Endostatin、VEGF、bFGF在肾癌组织的表达与肾癌的临床分期密切相关,Endostatin、VEGF、bFGF高表达者浸润性强,恶性程度高。（4）MVD与肾癌的临床分期、病理分级密切相关。MVD增高,肿瘤新生血管丰富,恶性程度高。（5）通过本实验加深了对肾癌血管生成调控机制的认识,Endostatin、VEGF和bFGF可望成为肾癌抗血管治疗的重要靶点。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 肾癌Endostatin、VEGF和bFGF的表达及其与肿瘤微血管密度的相关性研究
• 对象和方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 附录
• 综述
• Endostatin与肿瘤血管形成
• 综述参考文献
• 致谢