一些肿瘤标记物及抗肿瘤药物的毛细管电泳研究

论文摘要

肿瘤特别是恶性肿瘤是对人类健康威胁最严重的疾病之一。本论文选择了分析化学研究热点毛细管电泳法,兼容了分离科学和生命科学等领域的前沿课题作为研究内容,对一些肿瘤标记物及抗癌药物进行了系统的理论分析及应用研究。首先,对肿瘤的产生、诊断、治疗以及抗肿瘤药物的基本情况作了概述,指出毛细管电泳在核酸与药物分析方面的优势,提出本论文所要从事的研究工作的设想。应用CV、LSV 和DPV 等电化学方法对7-甲基鸟苷在玻碳电极上的伏安行为进行了研究,讨论了电极反应过程及机理,为毛细管电泳与电化学检测法联用提供了电化学研究基础。并建立了微分脉冲伏安法快速测定7-甲基鸟苷的电化学方法。该法选择性好、操作简单、快速、准确可靠,结果令人满意。用自组装的毛细管电泳-安培检测装置对肿瘤标记物7-甲基鸟苷和抗肿瘤抗生素丝裂霉素进行分离检测,旨以修饰核苷的含量表征临床抗肿瘤药物的疗效。7-甲基鸟苷与丝裂霉素C 检测限分别为0.050 μg/mL 与0.025 μg/mL,对模拟样品的测定获得良好的结果。本方法操作简单、无需对样品进行前处理、重现性好。由于抗肿瘤药物多具有骨髓毒性,为了考察其对人体的损害,采用毛细管电泳-安培检测法对修饰核苷（1-甲基鸟苷）、正常核苷（鸟苷）和两种抗肿瘤药物（丝裂霉素、5-氟尿嘧啶）进行了考察。在最优条件下,四组分在8 min 内实现基线分离,并成功用于模拟生物试样中上述四组分测定。针对肿瘤临床治疗中采用的多药联合化疗的实际用药情况,应用毛细管电泳-紫外检测法建立一种简单、快速用于7 种包含合成和天然抗肿瘤药物的定量分析方法。研究了毛细管区带电泳分离的主要因素,得到最优分离条件。该法成功地用于模拟尿样及模拟血浆中各组分的测定,回收率范围介于90.0109.2%,可作为快速测定体内抗肿瘤药物的新方法。最后,结合课题项目对抗精神病药物奋乃静与氟奋乃静的CZE-柱端安培检测法进行了研究。并将该法用于实际药物片剂中奋乃静与氟奋乃静浓度的测定,结果令人满意。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1. 癌症的形成及诊断
• 1.1.1. 什么是癌症
• 1.1.2. 癌症的形成
• 1.1.3. 癌症的诊断
• 1.2. 抗肿瘤药物
• 1.2.1. 抗肿瘤药物的特点
• 1.2.2. 抗肿瘤药物的分类
• 1.2.3. 抗肿瘤药物的毒性
• 1.2.4. 联合化疗
• 1.2.5. 抗肿瘤药物的检测
• 1.2.5.1. 高效液相色谱法
• 1.2.5.2. 电化学法
• 1.2.5.3. 薄层色谱扫描法
• 1.2.5.4. 紫外分光光度法
• 1.3. 毛细管电泳技术概况
• 1.3.1. 毛细管电泳的兴起
• 1.3.2. 毛细管电泳的基本原理
• 1.3.3. 毛细管电泳技术分离模式
• 1.3.4. 毛细管电泳的检测方法
• 1.3.4.1. 光学检测器
• 1.3.4.2. 电化学检测器
• 1.3.4.3. 其他检测器
• 1.3.5. 毛细管电泳在核酸及药物分析中的应用
• 1.3.5.1. 毛细管电泳在核酸分析中的应用
• 1.3.5.2. 毛细管电泳在药物分析中的应用
• 1.3.5.2.1. 毛细管电泳在抗癌药物分析中的应用
• 1.3.5.2.2. 毛细管电泳在其他药物分析方面的应用
• 1.4. 本论文的研究工作
• 第二章 7-甲基鸟苷在玻碳电极上的伏安行为研究
• 2.1. 引言
• 2.2. 实验部分
• 2.2.1. 实验仪器
• 2.2.2. 实验试剂
• 2.2.3. 实验步骤
• 2.2.3.1.溶液的配制
• 2.2.3.2.样品的处理
• 2.2.4. 实验方法
• 2.3. 结果与讨论
• 2.3.1. 实验方法的选择
• 2.3.2. 支持电解质 pH 值的选择
• 2.3.3. 支持电解质的选择
• 2.3.4. 脉冲宽度的选择
• 2.3.5. 扫描范围的选择
• 2.3.6. 体系的稳定性实验
• 2.3.7. 工作曲线与检测限
• 2.3.8. 干扰实验
• 2.3.9. 模拟样品的测定与回收率实验
• 2.4. 机理讨论
• 2.4.1. 7-MG 的伏安特性的研究
• 2.4.2. 有关参数的测定
• 2.4.2.1.恒电位库仑电解法测定电极反应电子转移数
• 2.4.2.2.动力学参数αn 的测定
• 2.4.2.3.电极反应质子转移数的测定
• 2.4.3. 电极反应机理推测
• 2.5. 结论
• 第三章 毛细管电泳-安培检测法用于肿瘤标记物和抗癌药物同时分离检测的研究
• 3.1. 引言
• 3.2. 实验方法
• 3.2.1. 仪器与试剂
• 3.2.1.1.仪器
• 3.2.1.2.试剂
• 3.2.1.3.微型石墨圆盘电极的制作
• 3.2.1.4.实验前准备
• 3.2.2. 溶液配制
• 3.3. 结果与讨论
• 3.3.1. 电化学性质与电极电位的选择
• 3.3.2. 运行液 pH 值与浓度的选择
• 3.3.3. 分离电压与进样条件的选择
• 3.3.4. 线性范围与检测限
• 3.3.5. 模拟尿样、血清与回收率的测定
• 3.4. 结论
• 第四章 DNA 碱基鸟苷、肿瘤标记物修饰核苷和抗癌药物的毛细管电泳-安培检测研究
• 4.1. 引言
• 4.2. 实验方法
• 4.2.1. 实验仪器
• 4.2.2. 实验试剂
• 4.2.3. 溶液制备
• 4.2.3.1 Palitzsc 缓冲液的制备
• 4.2.3.2 标准溶液的制备
• 4.2.3.3 模拟样品的制备
• 4.3. 结果与讨论
• 4.3.1. 电化学性质与电极电位的选择
• 4.3.1.1.5-FU, MMC, 1-MG 与 GR 的电化学性质
• 4.3.1.2.电极电位的影响
• 4.3.2. 缓冲液的研究
• 4.3.2.1.缓冲液的选择
• 4.3.2.2.缓冲液酸度的选择
• 4.3.2.3.缓冲液浓度的选择
• 4.3.3. 分离电压与进样条件的影响
• 4.3.3.1.分离电压的影响
• 4.3.3.2.进样时间的选择
• 4.3.4. 最佳实验条件
• 4.3.5. 线性范围与检测限
• 4.3.6. 模拟尿样、血清、血浆及其回收率的测定
• 4.4. 结论
• 第五章 毛细管区带电泳用于 7 种不同种类抗癌药物的分离测定
• 5.1. 引言
• 5.2. 实验部分
• 5.2.1. 试剂与仪器
• 5.2.2. 实验方法
• 5.2.2.1.缓冲液的配制
• 5.2.2.2.标准溶液的配制
• 5.2.2.3.模拟样品的配制
• 5.2.3. 最佳电泳条件
• 5.3. 结果与讨论
• 5.3.1. 电泳条件的优化
• 5.3.1.1.检测波长的选择
• 5.3.1.2.运行液 pH 值的选择
• 5.3.1.3.运行液的选择
• 5.3.1.4.运行液浓度的影响
• 5.3.1.5.分离电压的影响
• 5.3.2. 工作曲线、线性范围与检测限
• 5.3.3. 样品分析
• 5.4. 结论
• 第六章 其他研究工作—奋乃静和氟奋乃静的毛细管电泳柱端喷壁式安培检测
• 6.1.引言
• 6.2.实验部分
• 6.2.1. 仪器与试剂
• 6.2.2. 实验方法
• 6.3.结果与讨论
• 6.3.1. 电化学性质与电极电位的选择
• 6.3.2. 运行液浓度与 pH 值对分离的影响
• 6.3.3. 分离电压与进样条件的影响
• 6.3.4. 线性范围与检测限
• 6.3.5. 精密度实验
• 6.3.6. 样品分析
• 6.3.6.1.药物片剂
• 6.3.6.2.模拟尿样和兔血清样品的分析
• 6.4.结论
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间已发表论文