猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查与防控措施研究

论文摘要

繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）是猪“高热综合症”的主要病原之一,它能引起机体免疫抑制、导致继发感染,造成免疫失败等,对养猪业造成了巨大的经济损失。采用ELISA抗体检测方法,对从枣庄各区、市（2008-2010）采集的1055份（其中免疫PRRS灭活疫苗568份、免疫弱毒疫苗361份、未免疫126份）临床无临床症状猪的血清样品进行了抗体检测,结果显示,接种灭活苗、弱毒苗和未免疫无临床症状猪群的PRRSV抗体阳性率分别为71.1%（404/568）、88.1%（318/361）和53.2%（67/126）。结果表明调查猪场有PRRS自然感染；接种弱毒疫苗产生的抗体水平较灭活疫苗高。根据猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和猪瘟病毒（CSFV）的基因组序列设计了两对特异性引物,建立了同时检测PRRSV和CSFV的多重RT-PCR方法。采用该方法,对采自2008至2010年间枣庄地区临床发病猪群的172份病料和血清开展了PRRSV与CSFV的检测,结果显示,发病猪病料中高致病性PRRSV占56.4%（97/172）,CSFV占31.4%（54/172）,PRRSV和CSFV的多重混合感染占12.2%（21/172）,说明枣庄地区猪场仍然存在PRRSV感染,且混合感染现象同时存在。按照枣庄地区畜牧业发展情况,结合生猪养殖特点及疫情形势,我们研究制定和实施了一系列符合本地区实际的综合性防控措施,把免疫接种、科学管理、药物防治等工作贯穿养猪生产的整个过程,大大降低该病对养猪业的危害。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 猪繁殖与呼吸综合征简介
• 1.2 病原学
• 1.3 理化特性
• 1.4 分子生物学特征
• 1.5 病毒蛋白
• 1.6 流行病学
• 1.7 临床症状
• 1.8 病理变化
• 1.9 诊断方法
• 1.9.1 酶联免疫吸附试验
• 1.9.2 血清中和试验（SN）
• 1.9.3 间接荧光抗体试验（IFA）
• 1.9.4 免疫过氧化物酶单层试验（IPMA）
• 1.9.5 分子生物学诊断
• 1.10 防控措施
• 1.10.1 成立防控组织,加大工作保障
• 1.10.2 加强宣传,普及防治知识
• 1.10.3 做好疫情监测和及时掌握疫情动态
• 1.10.4 结合实际,科学采取预防措施
• 1.10.4.1 加强饲养管理
• 1.10.4.2 严格控制引种
• 1.10.4.3 做好环境卫生和消毒工作
• 1.10.4.4 做好防控猪病各项应对准备工作
• 1.10.4.5 做好防疫与疫病监测,建立无PRRS的无临床症状猪群
• 1.10.5 严抓疫苗免疫
• 1.10.5.1 合理选择疫苗
• 1.10.5.2 制定免疫程序
• 1.10.5.3 科学合理使用疫苗
• 1.10.6 药物防治
• 1.10.7 研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 样品
• 2.1.1.1 无临床症状猪血样
• 2.1.1.2 发病猪病料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.1.4 引物
• 2.1.5 溶液的配制
• 2.1.5.1 ELISA样品稀释
• 2.1.5.2 洗泽液的配制
• 2.1.5.3 RT-PCR相关溶液配制
• 2.2 方法
• 2.2.1 无临床症状猪血清抗体的检测
• 2.2.1.1 操作步骤
• 2.2.1.2 试验成立条件
• 2.2.1.3 结果判定
• 2.2.1.4 计算方法
• 2.2.1.5 数据处理
• 2.2.2 发病猪病料多重RT-PCR的检测
• 2.2.2.1 核酸提取
• 2.2.2.2 一步法RT-PCR扩增
• 2.2.2.3 特异性试验
• 2.2.2.4 敏感性试验
• 2.2.2.5 临床病料的多重RT-PCR检测
• 3 结果与分析
• 3.1 无临床症状猪血清抗体检测结果
• 3.1.1 无临床症状猪不同疫苗血清抗体的检测结果
• 3.1.2 不同品种猪血清中PRRSV抗体的阳性率比较
• 3.1.3 不同年龄段猪血清中PRRSV抗体的阳性率比较
• 3.2 发病猪病料多重RT-PCR检测结果
• 3.2.1 特异性试验
• 3.2.2 敏感性试验
• 3.2.3 多重RT-PCR检测病料
• 4 讨论
• 4.1 血清学调查结果
• 4.2 多重RT-PCR检测结果
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文