本文主要研究内容
作者王熙凤,孟庆玲,乔军,陈英,钟文强,贡莎莎,黄运福,才学鹏（2019）在《肝片吸虫CatL1D蛋白的免疫原性研究》一文中研究指出：【目的】研究绵羊肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)CatL1D蛋白的分子特征和免疫原性。【方法】利用RT-PCR技术扩增出CatL1D基因,用相关软件分析其编码蛋白的生物学信息。将CatL1D基因克隆入表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-CatL1D,进行BamHⅠ/XhoⅠ双酶切和测序鉴定。将pET-CatL1D载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blot分析;以纯化后的重组蛋白CatL1D为抗原免疫小鼠,利用间接ELISA方法检测抗体效价,分析其免疫原性。【结果】成功克隆了CatL1D基因,该基因全长981 bp,编码326个氨基酸,其中第21-79位氨基酸为组织蛋白酶前肽抑制剂结构域,第108-321位氨基酸为木瓜蛋白酶家族半胱氨酸蛋白酶保守结构域;CatL1D蛋白含有6个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、11个豆蔻酰化位点、1个蛋白激酶C磷酸化位点,含有10个优势抗原表位。成功构建了pET-CatL1D原核表达载体,诱导表达出CatL1D重组蛋白;SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组蛋白CatL1D分子质量为51 ku,以包涵体的形式表达,具有较强的反应原性。间接ELISA法检测结果表明,重组蛋白CatL1D免疫小鼠血清抗体效价可达1∶102 400,证实其具有良好的免疫原性。【结论】Fh重组蛋白CatL1D具有较强的抗原性,有开发为早期诊断抗原和亚单位疫苗的潜力。
Abstract
【mu de 】yan jiu mian yang gan pian xi chong (Fasciola hepatica,Fh)CatL1Ddan bai de fen zi te zheng he mian yi yuan xing 。【fang fa 】li yong RT-PCRji shu kuo zeng chu CatL1Dji yin ,yong xiang guan ruan jian fen xi ji bian ma dan bai de sheng wu xue xin xi 。jiang CatL1Dji yin ke long ru biao da zai ti pET-32a(+)zhong ,gou jian yuan he biao da zai ti pET-CatL1D,jin hang BamHⅠ/XhoⅠshuang mei qie he ce xu jian ding 。jiang pET-CatL1Dzai ti zhuai hua ru da chang gan jun BL21(DE3)gan shou tai xi bao ,IPTGyou dao biao da hou jin hang SDS-PAGEhe Western blotfen xi ;yi chun hua hou de chong zu dan bai CatL1Dwei kang yuan mian yi xiao shu ,li yong jian jie ELISAfang fa jian ce kang ti xiao jia ,fen xi ji mian yi yuan xing 。【jie guo 】cheng gong ke long le CatL1Dji yin ,gai ji yin quan chang 981 bp,bian ma 326ge an ji suan ,ji zhong di 21-79wei an ji suan wei zu zhi dan bai mei qian tai yi zhi ji jie gou yu ,di 108-321wei an ji suan wei mu gua dan bai mei jia zu ban guang an suan dan bai mei bao shou jie gou yu ;CatL1Ddan bai han you 6ge lao dan bai ji mei Ⅱlin suan hua wei dian 、11ge dou kou xian hua wei dian 、1ge dan bai ji mei Clin suan hua wei dian ,han you 10ge you shi kang yuan biao wei 。cheng gong gou jian le pET-CatL1Dyuan he biao da zai ti ,you dao biao da chu CatL1Dchong zu dan bai ;SDS-PAGEhe Western blotfen xi biao ming ,chong zu dan bai CatL1Dfen zi zhi liang wei 51 ku,yi bao han ti de xing shi biao da ,ju you jiao jiang de fan ying yuan xing 。jian jie ELISAfa jian ce jie guo biao ming ,chong zu dan bai CatL1Dmian yi xiao shu xie qing kang ti xiao jia ke da 1∶102 400,zheng shi ji ju you liang hao de mian yi yuan xing 。【jie lun 】Fhchong zu dan bai CatL1Dju you jiao jiang de kang yuan xing ,you kai fa wei zao ji zhen duan kang yuan he ya chan wei yi miao de qian li 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自西北农林科技大学学报(自然科学版)的王熙凤,孟庆玲,乔军,陈英,钟文强,贡莎莎,黄运福,才学鹏，发表于刊物西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年05期论文，是一篇关于肝片吸虫论文,组织蛋白酶论文,分子特征论文,免疫原性论文,西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：肝片吸虫论文; 组织蛋白酶论文; 分子特征论文; 免疫原性论文; 西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年05期论文;