多西他赛冻干脂质体的研究

论文摘要

多西他赛系从欧洲红豆杉（Taxus baccata L）中提取的前体化合物10-脱乙酰基浆果赤霉素Ⅲ经半合成得到的紫杉烷类化合物,对多种常见肿瘤均有确切疗效;但多西他赛不溶于水,目前上市的多西他赛是用Tween-80和无水乙醇的复合溶媒制成的注射剂,在临床应用中存在稳定性差、易过敏、溶血和毒副作用大等缺点,在一定程度上限制其应用。脂质体作为一种抗癌药物的优良载体,具有增加药物稳定性、降低毒副作用、延缓释放和靶向释药等优点,目前已用于多种抗癌药物。将多西他赛制成脂质体,旨在提高多西他赛的抗癌疗效、降低毒性和提高其稳定性。本文建立了测定脂质体中多西他赛含量的高效液相色谱法（HPLC）和测定包封率的凝胶色谱法,所建方法能准确测定脂质体中多西他赛的含量和包封率。以大豆磷脂和胆固醇为主要原料,采用薄膜分散法制备了多西他赛脂质体。对成膜温度、超声时间等进行了单因素考察,筛选出最佳工艺条件。以包封率为评价指标,以药物与大豆磷脂的质量比、大豆磷脂与胆固醇的质量比、水化介质的体积为因素,正交设计优化了处方。为提高脂质体的稳定性,考察了多西他赛脂质体的冻干工艺和冻干保护剂。确定多西他赛脂质体冻干的最优条件如下:预冻温度为-40℃,预冻方式为快速降温,预冻时间为8 h,总干燥时间为48 h,冻干保护剂为5%甘露醇和10%乳糖。进行了多西他赛冻干脂质体的质量研究和初步稳定性研究。多西他赛冻干脂质体外观平整饱满,再分散性良好,粒子均匀圆整,平均粒径为155.7±0.9 nm,平均包封率为85.9±0.4%;24h累积释放率达70.7%,释放曲线符合Weibull方程。以外观性状、再分散性、平均粒径、包封率、药物含量、pH值、过氧化值等为指标,对多西他赛脂质体的稳定性作了初步考察,结果表明多西他赛脂质体6±2℃放置6个月稳定性良好。以多西他赛注射液为对照,对多西他赛冻干脂质体在大鼠体内的药代动力学及组织分布进行了研究。实验结果表明,注射给药SD大鼠相同剂量的多西他赛冻干脂质体和普通注射剂后,脂质体组可以延长药物在体内的循环作用时间,并且在肝、脾、肺、肾等器官有较高的组织浓度。初步考察了多西他赛冻干脂质体对人乳腺癌MDB-MA-468裸小鼠皮下移植瘤的疗效。实验结果表明,多西他赛脂质体各剂量组和多西他赛注射液组均对人乳腺癌MDB-MA-468裸小鼠移植瘤具有显著的生长抑制作用,呈现出明显的量效关系。与多西他赛注射液比较,同等剂量的脂质体疗效优于市售注射液。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 1 多西他赛的研究现状
• 2 脂质体的研究概述
• 3 立题依据和主要研究内容
• 第一章 多西他赛脂质体体外分析方法的建立
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法与结果
• 2.1 多西他赛脂质体含量测定方法的建立
• 2.2 包封率的测定
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第二章 多西他赛脂质体的处方设计与制备工艺研究
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法与结果
• 2.1 多西他赛脂质体制备方法的筛选
• 2.2 多西他赛脂质体的处方筛选与工艺优化
• 2.3 优化处方与工艺的验证
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第三章 多西他赛冻干脂质体的冻干工艺研究
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法与结果
• 2.1 冻干效果的考察指标
• 2.2 冻干工艺的考察
• 2.3 冻干保护剂的筛选
• 2.4 多西他赛冻干脂质体制备的最终处方与工艺
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第四章 多西他赛冻干脂质体的质量评价及其初步稳定性研究
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法与结果
• 2.1 检查项目
• 2.2 初步稳定性研究
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第五章 多西他赛冻干脂质体的体内药动学研究
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 1.3 实验动物
• 2 方法与结果
• 2.1 SD大鼠血浆样品LC/MS/MS分析方法
• 2.2 SD大鼠组织样品LC/MS/MS分析方法
• 2.3 SD大鼠单剂量静注给药多西他赛药代动力学和组织分布研究
• 3 讨论
• 4 本章小结
• 第六章 多西他赛冻干脂质体的药效学研究
• 1 仪器与材料
• 1.1 仪器
• 1.2 材料
• 2 方法与结果
• 2.1 给药方案
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果与讨论
• 3 本章小结
• 结论
• 1 本文所做工作总结
• 2 本文创新点
• 3 后续工作
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文