重组人肝再生增强因子（rhALR125）表达、纯化及药效学的研究

论文摘要

肝再生增强因子（ALR125）在受损肝组织的再生过程中起着重要的作用,能促进肝细胞的快速生长,具有广泛的应用前景,本论文旨在对重组人肝干再生增强因子实验室规模的表达、纯化及药效学进行研究。实验中,完成了菌种的构建筛选、蛋白的表达和纯化、对目的蛋白的检测及初步动物药效学研究。首先,构建了温度诱导的pBV220-rhALR125质粒,转化构建了稳定表达的BL21菌株,通过比较表达效率从而筛选获得高效表达的菌株,传代50代进行了菌种的稳定性研究,建立了菌种库;其次,通过离子交换层析和凝胶过滤层析,对蛋白进行纯化并检测;最后,建立了小鼠急性肝损伤模型,静脉注射rhALR125并观察了其对损伤小鼠肝组织的促再生作用。通过本实验研究,建立了一种稳定的表达纯化方法,使rhALR125纯度达到98%,比活达到300U/mg,药效试验证明其能有效促进急性肝损伤模型小鼠肝组织的恢复。实验结果达到了预期的目标,为以后深入研究ALR125的作用机制乃至作为治疗药物来大规模生产制备打下了坚实的基础。

论文目录

• 内容提要
• 第一章 前言
• 1. 肝再生增强因子的发现及其分子结构特点
• 2. 肝再生增强因子的生物学功能
• 3. ALR 与疾病的治疗
• 4. 研究意义及实验构思
• 第二章 实验器材与方法
• 1. 实验器材
• 2. 实验方法
• 第三章 结果与讨论
• 1. 菌种的构建与表达
• 2. 蛋白的纯化
• 3. 目标蛋白的检测
• 4. rhALR125 治疗急性肝损伤模型小鼠的药效学研究
• 结论
• 参考文献
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 致谢
• 导师简介
• 作者简历