锌对高同型半胱氨酸诱导鼠胚心脏畸形的干预研究

论文摘要

目的先天性心脏病是人类所有出生缺陷中最常见的疾病之一。它由多种复杂因素共同作用而来,孕期各种营养物质的缺乏及致畸剂的接触在心脏发育异常作用病因中占60%左右。高同型半胱氨酸血症能引起心脏发育异常,其自身所致的氧化应激损伤可能是重要发病环节。锌元素是体内微量元素的一种,对胚胎发育有至关重要的作用,根据其在抗氧化作用方面,推测与同型半胱氨酸诱导胚胎心脏畸形作用之间具有相关性,本实验以大鼠为实验对象,同型半胱氨酸对孕鼠致畸,建立胎鼠先天性心脏病模型。孕周给予常规剂量锌剂补充,通过胎心畸形率比较,以探讨锌元素是否能干预同型半胱氨酸对心脏发育的毒性作用,同时探讨其作用的可能机制,为孕期增补锌元素以预防先天性心脏病提供实验理论依据。方法本实验选用SD成年健康清洁级雌,雄大鼠各40只,常规方法交配获取孕鼠后,按体重接近随机分为5个组,每组8只:空白对照组（等量蒸留水+等量生理盐水注射）、单纯同型半胱氨酸（HCY）致畸组（等量蒸留水+8μmol/L HCY注射）、锌+HCY组（30mg/kg·d锌+8μmol/L HCY注射）、叶酸+HCY组（30mg/kg·d叶酸+8μmol/L HCY注射）、联合组（30mg/kg·d锌+30mg/kg·d叶酸+8μmol/L HCY注射）五组,分别于妊娠13,15,17,19天取材,通过切片进行胎鼠心脏组织学畸形观察;化学比色法测定各组孕鼠血清超氧化物歧化酶活力值;逆转录一聚合酶链方法检测孕鼠外周血淋巴细胞MT-I亚型基因mRNA及胚胎心脏组织的GATA-4因子mRNA表达。结果1.各组孕鼠各妊娠天数取材时均发现胚胎有不同程度吸收,畸形及死胎,妊娠相应天数注射HCY后,胚胎总畸形率与空白对照组相比增高（P<0.001）;干预组与单纯注射HCY组比较,畸形率均明显减少（P<0.001）。2.各妊娠天数（13,15,17,19天）,HCY组胎心畸形率与对照组比较明显增加（P<0.001）;干预组与HCY组比较,畸形率均明显减少（P<0.05）,畸形表现为发育延迟,心房缺如,室间隔缺损,心室缺损等。各妊娠天数胎心畸形变化呈下降趋势,期间比较差异无显著性（P>0.05）。3. HCY组孕鼠血清CuZn-SOD活力值较对照组比较明显下降（P<0.005）;干预组与HCY组比较,CuZn-SOD活力值增加,锌+HCY组及联合组（P<0.01）,叶酸+HCY组（P<0.05）;锌+HCY组及联合组与叶酸+HCY组比较（P<0.05）。4. HCY组孕鼠外周血淋巴细胞MT-I亚型基因mRNA表达较对照组明显下降:HCY组与叶酸+HCY组（P<0.001）,锌+HCY与联合组（P<0.05）;干预组与HCY组比较表达均明显增加,叶酸+HCY组（P<0.01）,锌+HCY及联合组（P<0.001）;干预组间比较:叶酸+HCY组与另两组比较（P<0.001）。5.各组孕鼠各妊娠天数胎鼠心脏GATA-4因子mRNA表达比较:各组间未见明显改变,差别无统计学意义（P>0.05）;胎鼠心脏GATA-4因子妊娠期间表达呈逐渐增高趋势,但各妊娠天数间比较差异无显著性（P>0.05）。结论1.造模成功,HCY对鼠胚胎心脏发育具有毒性作用,表现为发育延迟,心房缺如,室间隔缺损,心室缺损及大体畸形等,且畸形在早孕期更易发生。2.孕期补锌胎心畸形率较HCY组显著下降,表明补锌能有效地干预HCY对鼠胚胎心脏发育的毒性作用,且干预在孕早期更为显著,提示孕早期补锌对胎心发育具有保护作用。3.孕期锌与叶酸两者同时补充,胎心畸形率较HCY组显著下降,提示可能存在协同作用。4.补锌组孕鼠血清Cu-ZnSOD活力值较HCY组显著增高,提示锌元素有可能是通过抑制氧化反应的发生进而发挥干预作用的。5.补锌组孕鼠外周血淋巴细胞MT-I型基因表达较HCY组显著增高,而胎鼠心脏GATA-4因子mRNA表达无明显改变,提示孕期补锌可能通过某种特定的机制诱导MT蛋白的产生,通过后者的强抗氧化机制干预HCY对胚胎心脏作用产生的畸形作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 研究内容
• 第一部份 锌对高同型半胱氨酸诱导鼠胚胎心脏畸形的干预
• 一 材料与方法
• 二 结果
• 三 讨论
• 第二部份 锌及相关因子对HCY诱导鼠胚心脏畸形干预的机制探讨
• 一 材料与方法
• 二 结果
• 三 讨论
• 结论
• 参考文献
• 英文缩略词表
• 致谢
• 综述
• 附录