雷米普利对实验性糖尿病大鼠心脏保护作用的研究

论文摘要

目的：心肌缺血预适应（ischemia preconditioning，IPC）是一种强有力的内源性心脏保护机制，其对糖尿病心脏是否亦具有保护效应，尚存在争议。血管紧张素转化酶抑制剂雷米普利在非糖尿病大鼠可模拟IPC产生心脏保护作用，并且能降低糖尿病患者心血管并发症的发生率。本研究建立实验性糖尿病大鼠模型，在此基础上评价IPC及雷米普利对实验性糖尿病大鼠是否产生预适应样心脏保护作用，并观察糖尿病心肌缺血损伤的变化。方法：健康雄性Wistar大鼠75只，随机分为6组。非糖尿病缺血／再灌注组（I／R）、非糖尿病缺血预适应组（IP）、糖尿病缺血／再灌注组（DM+I／R）、糖尿病缺血预适应组（DM+IP）、雷米普利缺血／再灌注组（RAM+DM+I／R）、雷米普利缺血预适应组（RAM+DM+IP）。RAM+DM+I／R组、RAM+DM+IP组大鼠连续4周以雷米普利生理盐水溶液灌胃（1mg／kg／day）；I／R组、IP组、DM+I／R组、DM+IP组大鼠连续4周用与药物等体积的生理盐水灌胃。灌胃结束后，麻醉各组动物均于开胸术后在冠状动脉左前降支下穿过一丝线成活结，拉紧活结造成该动脉缺血。缺血／再灌注组行缺血30min继之2h再灌注；缺血预适应组则在缺血30min前执行IPC程序，即5min缺血继之5min再灌注，重复三次。各组均连续监测心率、血压、ST-段变化以及缺血期室性心律失常发生情况；于再灌注2h末行台盼蓝、TTC染色，测定心肌梗死范围；每组各有2只大鼠于再灌注2h末取左心室肌组织，采用脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的dUTP缺口开端标记法检测心肌细胞凋亡，并用免疫组织化学染色法检测凋亡相关基因Bcl-2与Bax的表达情况。结果：1．IPC对非糖尿病大鼠心脏保护作用I／R组心肌损伤严重，表现为缺血期ST-段显著抬高（0.527±0.107mV），室早（Ventricular premature contraction，VPC）出现时间早（1.96±1.75min）、持续时间长（20.67±7.42min），室速（ventricular tachycardia，VT）和室颤（ventricular fibrillation，VF）发生率高（60％，60％），心肌梗死面积大（32.98±10.99％），心肌细胞凋亡指数（apoptotic index，AI）高（16.68±3.35％），Bcl-2／Bax比值低（0.421±0.105）。与I／R组比较，IPC显著降低心脏缺血期ST-段抬高幅度（0.285±0.042 vs 0.527±0.107mV，P＜0.001），推迟VPC出现时间（14.29±4.81 vs 1.96±1.75min，P＜0.001），缩短VPC持续时间（8.11±3.52 vs 20.67±7.42min，P＜0.001），降低VT、VF发生率（10％vs 60％，P＜0.05；0 vs 60％，P＜0.01），缩小心肌梗死范围（15.86±3.02％vs 32.98±10.99％，P＜0.01），降低心肌细胞AI（8.09±2.38％vs 16.68±3.35％，P＜0.001），上调Bcl-2／Bax比值（0.951±0.060 vs 0.421±0.105，P＜0.001）。IPC对非糖尿病大鼠心肌缺血／再灌注损伤（ischemia／reperfusion，I／R）具有明显的保护作用。2．非糖尿病与实验性糖尿病大鼠心肌缺血／再灌注损伤程度比较与I／R组比较，DM+I／R组缺血期VPC出现时间、持续时间（6.32±4.44 vs 1.96±1.75min，P＞0.05；16.35±5.63 vs 20.67±7.42min，P＞0.05），VT、VF发生率（60％vs 60％，P＞0.05；50％vs 60％，P＞0.05）无统计学差异，心肌梗死范围没有明显扩大（34.41±12.60％vs 32.98±10.99％，P＞0.05）。但心脏缺血期ST-段抬高幅度明显升高（0.675±0.154 vs 0.527±0.107mV，P＜0.05），心肌细胞AI增加（25.56±3.06％vs 16.68±3.35％，P＜0.001），Bcl-2／Bax比值下降（0.105±0.065 vs 0.421±0.105，P＜0.001）。表明与非糖尿病比较，实验性糖尿病大鼠I／R损伤一定程度上较严重。3．IPC对实验性糖尿病大鼠心脏保护作用与DM+I／R组比较，DM+IP组缺血期ST-段抬高幅度显著降低（0.489±0.169vs 0.675±0.154mV，P＜0.05），VPC出现时间推迟（17.92±5.49 vs 6.32±4.44min，P＜0.001），持续时间缩短（6.14±4.78 vs 16.35±5.63 min，P＜0.01），VT、VF发生率降低（10％vs 60％，P＜0.05；10％vs 50％，P＜0.05），心肌梗死范围缩小（17.16±10.03％vs 34.41±12.60％，P＜0.01）。心肌细胞AI减少（20.24±4.22％vs 25.56±3.06％，P＜0.001），Bcl-2／Bax比值上调（0.221±0.101 vs 0.105±0.065，P＜0.05）。IPC对实验性糖尿病大鼠心肌I／R具有明显保护作用。4．雷米普利对实验性糖尿病大鼠心脏保护作用与DM+I／R组比较，RAM+DM+I／R组心脏缺血期ST-段抬高幅度显著降低（0.422±0.155 vs 0.675±0.154mV，P＜0.01），VPC出现时间推迟（12.12±6.33 vs 6.32±4.44min，P＜0.05），持续时间缩短（10.27±5.24 vs 16.35±5.63min，P＜0.05），VT、VF发生率降低（30％vs 60％，P＜0.05；0 vs 50％，P＜0.05），心肌梗死范围缩小（15.35±7.26％vs 34.41±12.60％，P＜0.01）。心肌细胞AI减少（18.19±3.12％vs 25.56±3.06％，P＜0.001），Bcl-2／Bax比值上调（0.269±0.162 vs 0.105±0.065，P＜0.01）。表明雷米普利对实验性糖尿病大鼠I／R具有明显保护作用。与DM+I／R组比较，RAM+DM+IP组心脏缺血期ST-段抬高幅度未见明显降低（0.608±0.224 vs 0.675±0.154mV，P＞0.05），但VPC出现时间推迟（11.10±2.72 vs 6.32±4.44min，P＜0.05），持续时间缩短（8.77±5.34 vs 16.35±5.63min，P＜0.05），VT、VF发生率降低（10％vs 60％，P＜0.05；10％vs 50％，P＜0.05），心肌梗死范围缩小（16.90±11.51％vs 34.41±12.60％，P＜0.01）。心肌细胞AI减少（19.80±4.18％vs 25.56±3.06％，P＜0.001），Bcl-2／Bax比值上调（0.216±0.201 vs 0.105±0.065，P＜0.05）。表明RAM+DM+IP同样对糖尿病大鼠心肌I／R损伤具有保护作用。与DM+IP组比较，RAM+DM+I／R组心脏缺血期ST-段抬高幅度，VPC出现、持续时间，心肌梗死范围无显著差异；心肌细胞AI，Bcl-2／Bax比值亦无统计学差异。表明雷米普利与IPC二者保护作用强度相当。与DM+IP组比较，RAM+DM+IP组缺血期ST-段抬高幅度，VPC出现、持续时间，VT、VF发生率，心肌梗死范围均无统计学差异；心肌细胞AI，Bcl-2／Bax比值亦无统计学差异。表明雷米普利与IPC无协同保护作用。结论：1．与非糖尿病比较，实验性糖尿病大鼠I／R损伤在一定程度上较严重。2．IPC可减轻实验性糖尿病大鼠I／R所致缺血期室性心律失常的严重程度，缩小心肌梗死范围，减少心肌细胞凋亡。3．雷米普利可减轻实验性糖尿病大鼠I／R所致缺血期室性心律失常的严重程度，缩小心肌梗死范围，降低心肌细胞凋亡，其保护作用与IPC相当。4．雷米普利与IPC无协同保护作用。

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• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语
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• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 在校发表综述
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