口服胰岛素龙血竭纳米球制剂的研究

论文摘要

糖尿病是威胁人类健康的重大疾病之一,目前治疗Ⅰ型糖尿病最有效的药物是胰岛素。临床上胰岛素的使用方式为注射,且为终生给药,这种给药方式给病人带来了极大的痛苦与不便。为此,本研究开发了胰岛素的口服纳米制剂——胰岛素龙血竭纳米球（ISDN）。传统中药龙血竭（SD）具有活血化淤,消肿止痛,止血补血之功效,临床上龙血竭可用于治疗糖尿病足;另外,有研究表明龙血竭也具有一定的降血脂、血糖效果,可作为糖尿病的辅助治疗药物。本文选择龙血竭为壁材,采用沉淀法包裹胰岛素,制成ISDN,并添加β-环糊精（β-CD）,进一步制成口服粉剂,同时对制备工艺及其参数进行了优化考察,确定了最优的制备工艺,并建立了胰岛素在ISDN中的高效液相色谱（HPLC）的检测方法,最后还对ISDN的口服降血糖效果作了初步的研究。采用HPLC法测定ISDN中胰岛素的含量。样品的检测采用Phenomenex C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以0.1mol·L-1磷酸二氢钠溶液—乙腈为流动相,在前15 min以72-28的比例进行等度洗脱,之后进行梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为210 nm,柱温30℃。结果表明:胰岛素在5～200μg·mL-1范围内,峰面积与浓度成良好线性关系（r=0.9999）,平均回收率为99.2%,平均日内、日间精密度分别为0.4、0.7。以扫描和透射电镜观察微粒的外形,粒度分析仪分析其平均粒径及分布宽度,HPLC法检测其胰岛素含量。结果表明:ISDN微粒外形为球形,平均粒径为114±13 nm,平均包封率为63.6±5.4%,平均载药量为9.3±0.2 IU·mg-1。体外释放研究表明,ISDN及ISDN-β-CD粉剂均具有缓释效果。糖尿病小鼠口服不同剂量ISDN-β-CD,结果显示:50 IU·kg-1、70 IU·kg-1和90 IU·kg-1均有降血糖效果,而30 IU·kg-1无效果。与皮下注射胰岛素相比,口服制剂的药效更持久。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1.胰岛素概况
• 1.1.1.胰岛素发现过程中的重大事件
• 1.1.2.胰岛素的制备
• 1.2.胰岛素的测定
• 1.2.1.生物测定法（in vivo bioassay）
• 1.2.2.免疫测定（immunoassay,IA）
• 1.2.3.放射受体测定（Radioreceptor assay,RRA）
• 1.2.4.理化测定
• 1.2.5.胰岛素标准品
• 1.3.胰岛素口服制剂的研究现状
• 1.3.1.结构修饰
• 1.3.2.添加膜吸收促进剂
• 1.3.3.肠溶包衣
• 1.3.4.使用代谢酶抑制剂
• 1.3.5.结肠给药
• 1.3.6.乳剂
• 1.3.7.脂质体
• 1.3.8.具受体介导吞饮机制的蛋白结合物
• 1.3.9.纳米粒
• 1.4.龙血竭
• 1.5.本课题的提出
• 参考文献
• 第二章 RP-HPLC测定胰岛素龙血竭纳米颗粒中胰岛素的含量
• 2.1.仪器与材料
• 2.1.1.仪器
• 2.1.2.试剂药品
• 2.2.实验方法
• 2.2.1.标准溶液的制备
• 2.2.2.ISDN的制备
• 2.2.3.色谱条件
• 2.2.4.专一性评价
• 2.2.5.线性关系考察
• 2.2.6.回收率和日内、日间精密度的测定
• 2.2.7.样品的测定
• 2.3.结果
• 2.3.1.专一性评价
• 2.3.2.线性关系考察
• 2.3.3.回收率和日内、日间精密度的测定
• 2.3.4.样品的测定
• 2.4.讨论
• 参考文献
• 第三章 胰岛素龙血竭口服制剂的制备及表征
• 3.1.仪器与材料
• 3.1.1.仪器
• 3.1.2.材料
• 3.2.实验方法
• 3.2.1.样品的制备
• 3.2.2.样品性质的表征
• 3.2.3.ISDN-β-CD制备工艺参数的考察
• 3.3.结果与讨论
• 3.3.1.ISDN及ISDN-β-CD粉剂的形态学考察
• 3.3.2.ISDN及ISDN-β-CD粉剂的体外释放
• 3.3.3.ISDN及其粉剂制备工艺参数的研究结果
• 3.4.本章小结
• 参考文献
• 第四章 胰岛素龙血竭口服制剂体内药效学初步研究
• 4.1.实验材料
• 4.2.实验方法
• 4.2.1.糖尿病模型小鼠的建立
• 4.2.2.糖尿病小鼠灌胃实验
• 4.3.结果与讨论
• 4.3.1.小鼠的饮食、饮水和排尿情况
• 4.3.2.糖尿病小鼠灌胃给药后降血糖作用
• 4.3.3.ISDN-β-CD的剂量对降血糖效果的影响
• 4.4.本章小节
• 参考文献
• 第五章 结论与展望
• 5.1.结论
• 5.2.建立HPLC法测定ISDN中胰岛素的含量
• 5.3.胰岛素龙血竭口服药剂制备工艺的考察及其药剂学方面的研究
• 5.4.糖尿病小鼠口服降血糖效果
• 5.5.课题展望
• 致谢
• 研究生期间的科研成果