VDR基因多态性和hBD与溃疡性结肠炎的关系

论文摘要

背景及目的溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis, UC）是原因不明的肠道慢性非特异性疾病,对其发病机制的研究目前集中在遗传因素,环境因素和免疫调节紊乱等方面。UC是多基因疾病,目前发现与UC易感性相关的基因有二十余种,分布于1-19号染色体上。维生素D具有重要的免疫调节和抗微生物的作用,可调控上皮细胞抑菌肽的产生,参与肠道微生态的平衡,调节多种细胞的生长和分化。维生素D受体（Vitamin D receptor,VDR）基因位于第12号染色体,是维生素D发挥作用的效应基因,在人体内具有重要生理作用。VDR基因具有SNP多态性,含有多个限制性内切酶位点,如FokⅠ、BsmⅠ、ApaⅠ、TaqⅠ、poly （A）和Cdx-2等,这些SNP位点多态性与多种疾病密切相关。国外有研究表明,VDR基因多态性与UC易感性相关。由于基因多态性与种族和地域有密切关系,在我国,VDR基因多态性是否与UC易感性相关,目前还没有报道。人β-防御素（human bata-defensin,hBD）是在人肠道上皮细胞表达的抗微生物多肽,是目前研究得最多的抑菌肽,具有强大的抗菌活性,同时参与机体的先天免疫和后天免疫。在肠道组织中,p-防御素表达的改变与炎症过程的相关性还不是十分清楚。目前对肠道组织p-防御素的表达情况研究的比较多,但是同时研究VDR和β-防御素在肠道组织表达的文献很少。本课题探讨VDR基因多态性与中国北方汉族UC发病的相关性及活动性UC结肠组织中VDR mRNA和β-防御素1（hBD-1） mRNA、β-防御素2 （hBD-2） mRNA的表达,为进一步揭示UC的发病机制提供依据。材料与方法应用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,检测218例中国北方汉族人群UC患者和251例汉族健康对照者的VDR基因四个（ApaⅠ、TaqⅠ、BsmⅠ和Fok I）限制性内切酶位点的多态性。应用实时荧光定量PCR （Real-time PCR）方法检测30例活动性UC患者和32例正常对照者的肠道上皮组织中VDR mRNA、hBD-1 mRNA和hBD-2 mRNA的表达。结果VDR基因在中国北方汉族人群中具有多态性,四个位点基因型均符合Hardy-Weinberg平衡,表明本研究所纳入样本能够代表总体基因型分布规律。在VDR基因的四个多态性位点中,只有BamⅠ位点与UC易感性相关。与对照组相比,Bb基因型频率在UC组明显增加（28.4% vs.18.7%χ2=6.044, P=0.014; OR=1.739,95%CI=1.122-2.697）,B等位基因频率在病例组比对照组明显增加（14.7% vs. 7.8%χ2=6.222, P=0.013; OR=1.670,95% CI= 1.113-2.506）。其余三个多态性位点（ApaⅠ、TaqⅠ和FokⅠ）各基因型及等位基因频率均与UC易感性无关。VDR基因多态性与UC临床表型无相关性。在活动性UC结肠粘膜中,VDR mRNA和hBD-2 mRNA表达均较正常粘膜升高（P<0.05）, hBD-1 mRNA的表达在两组中无统计学意义。结论在中国北方汉族人群中,VDR基因Bsm I位点多态性与UC易感性具有相关性,与UC临床表型无相关性。VDR基因可能是通过上调hBD-2 mRNA在肠道的表达而影响UC的发病。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 第2章 文献综述
• 2.1 炎症性肠病的发病机制研究进展
• 2.2 VD和VDR基因的研究进展
• 2.3 防御素与IBD发病的相关研究进展
• 第3章 VDR基因多态性与溃疡性结肠炎的相关性研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 3.5 结论
• 第4章 VDR mRNA和hBD mRNA在活动性UC组织的表达
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 4.5 结论
• 第5章 结论
• 参考文献
• 附图
• 博士在读期间所取得的科研成果
• 作者简介
• 致谢