中药治疗奶牛卵巢静止的研究

论文摘要

母畜不孕症严重影响畜牧业的发展,成为世界性的经济问题。卵巢静止是最常见的不孕症之一。中兽医应用中药和针灸治疗这种不孕症具有明显的优势,可避免西医使用激素治疗出现耐药性、剂量不确定、药物残留等弊端,但也存在一些问题需改进提高,诸如疗效不稳、处方庞大、给药不便等等。本研究针对卵巢静止性不孕症,研制出两种中药制剂,并在临床上进行实验,旨在寻找治疗卵巢静止不孕症的高效低毒无残留的天然药物,更好地为畜牧生产服务。本实验根据中医学治疗妇女不孕症和中兽医临床上对猪、牛、羊等的实验报道,拟用12味常用中草药进行单味药对小鼠生殖器官影响实验,筛选出效果最好的单味药作为主药,并按照中医药学理论,考查药物间的合理配伍及药物与动物生殖内分泌之间的关系,合理组方,使药物间产生协同作用。组成五个方剂再次应用于小白鼠,观测了小白鼠子宫和卵巢总重量、子宫角中段外径厚度、子宫角长度及卵巢、子宫的组织学变化,根据不同方剂对小白鼠上述检测指标的影响,筛选出对小白鼠生殖系统有较大促进作用的中草药组方。将选出中药组方应用于患有卵巢静止的病牛,并采集病牛血样,检测其中孕酮、雌二醇及钙磷的含量。试验结果如下:1.部分中药处理后小白鼠的子宫和卵巢总重量、子宫角中段外径厚度及大型卵泡比例和最大卵泡直径较对照组发生了显著变化,其中红花、淫羊藿、益母草、菟丝子、肉苁蓉、川芎等数味中药效果最好,选定为拟方主药。自拟中药组方试验中,方Ⅱ、方Ⅲ的各项观察指标明显超过对照组及其他组方,说明中药组方Ⅱ、中药组方Ⅲ对小白鼠的生殖系统发育有显著的促进作用。2.根据筛选结果,确定中药组方Ⅱ、方Ⅲ为临床试验药物。临床对卵巢静止奶牛治疗试验结果表明,中药组方Ⅱ、中药组方Ⅲ效果明显,有效率(发情率)分别为86.67%和73.33%,治愈率(受胎率)分别为60.00%和46.67%。中药组方对患卵巢静止1年以下的病牛有效率(发情率)可以达到100%和88.89%,治愈率(受胎率)分别为88.89%和77.78%。所以经临床使用,中药组方Ⅱ取得了最佳效果。3.不使用任何药物的对照组奶牛血清中孕酮(P4)含量均在0.2 ng/mL以下,雌二醇(E2)均在5 pg/mL以下,并无周期性变化。应用中药组方的试验组奶牛P4含量测定结果显示,受试母牛在服药前P4最低为0.16 ng/mL,最高含量为0.22 ng/ml,方Ⅱ组和方Ⅲ组平均分别为0.18 ng/mL和0.19 ng/mL。用药后24h浓度出现略微上升,随后下降直到用药后7d右时间浓度保持在较低的水平,变化不明显。用药后10d两组P4浓度分别达到1.15 ng/mL和0.89 ng/mL并持续升高,到15d前后时其平均浓度升高到3.22 ng/mL和3.59 ng/mL左右。E2含量测定结果显示,受试母牛在服药前血清E2最低为4.41 pg/mL,最高含量为4.93pg/mL,方Ⅱ和方Ⅲ组平均分别为4.58 pg/mL和4.75 pg/mL。两组中药应用后E2平均浓度水平逐渐升高,并在应用第3d时浓度分别由7.17 pg/mL和7.19 pg/mL开始迅速上升,至应用中药后5d时分别达到16.3 pg/mL和15.8pg/mL,用药7d后E2浓度逐渐降低。4.试验组病牛用药前后血中钙含量增加,磷含量没有明显变化。临床试验中对于病程超过一年,经过多次激素治疗无效的病牛,使用中药组方进行治疗效果不理想。对于这部分病牛如何恢复正常生殖内分泌活动,提高药物疗效需要进一步改进组方,并进行临床试验。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 引言
• 1.1 母畜不孕症研究进展
• 1.2 卵巢静止的研究进展
• 1.2.1 卵巢静止的病因与病理
• 1.2.2 卵巢静止的诊断
• 1.2.3 卵巢静止的治疗
• 1.3 雌激素和孕酮在生殖中的作用
• 1.3.1 雌激素
• 1.3.2 孕酮
• 1.4 本研究的目的和意义
• 2. 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 中草药
• 2.1.2 主要药品及试剂
• 2.1.3 放免试剂盒
• 2.1.4 主要实验仪器
• 2.2 实验动物
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 促进卵巢、子宫发育中草药的筛选
• 2.3.2 中药组方治疗奶牛卵巢静止实验
• 3. 实验结果
• 3.1 中草药筛选实验
• 3.1.1 单味中药处理组小白鼠的生殖器官变化
• 3.1.2 复方中药处理组小白鼠的生殖器官变化
• 3.1.3 应用中药组方后小白鼠卵巢组织学变化
• 3.1.4 应用中药组方后小白鼠子宫内膜的组织学变化
• 3.2 中药方剂对卵巢静止奶牛治疗效果
• 3.3 中药组方对奶牛生殖内分泌的影响
• 4浓度变化'>3.3.1 中药方剂应用后奶牛的血清 P₄浓度变化
• 2浓度变化'>3.3.2 中药方剂应用后奶牛的血清 E₂浓度变化
• 3.4 中药方剂应用后奶牛的血清钙磷浓度变化
• 4. 讨论
• 4.1 促进卵巢、子宫发育中草药的筛选
• 4.2 中药方剂治疗奶牛卵巢静止的效果
• 4.3 中草药对奶牛的影响
• 4.3.1 使用中药方剂后病牛血清激素浓度的变化
• 4.3.2 使用中药方剂后病牛血中钙磷含量的变化
• 5. 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文