章鱼中肉碱、章鱼肉碱检测方法研究

论文摘要

肉碱、章鱼肉碱是章鱼中的主要活性物质,其药用及营养价值已得到广泛的认可,具有广阔的应用前景。通过对章鱼活性物质的研究开发,将极大地促进医药业及保健食品的发展。本论文以章鱼中的肉碱、章鱼肉碱二种活性物质为研究对象,建立了同时检测二种化合物的高效液相色谱方法,该方法专属性高,线性关系、精密度良好,对水产品中该类化合物的含量分析及食品营养安全的评定具有重要意义。1、肉碱、章鱼肉碱的柱前衍生-高效液相色谱检测方法的建立:色谱条件:色谱柱:Waters Symmetry C18柱（150×4.6 mm,5μm）;流动相:0.6%三乙胺（pH = 6.20）/甲醇=40/60（V/V）;流速:0.6 mL.min-1;柱温:35℃;检测波长:λ= 263 nm;进样量:20μL。衍生条件:选取芴甲氧羰酰氯（FMOC）作为衍生试剂,确定了二种化合物的最佳衍生条件为:pH= 10.40的反应体系, 30mmol?L-1的FMOC乙腈溶液,肉碱及章鱼肉碱于60℃水浴反应30min衍生效果最佳。2、章鱼中肉碱、章鱼肉碱提取方法的建立及优化:采用酸溶液提取章鱼中的肉碱及章鱼肉碱,有机溶剂萃取法纯化提取液,以上述柱前衍生-高效液相色谱法为分析方法,通过单因素试验和正交试验确定了最佳提取条件: 5%三氯乙酸溶液,料液比1:4,超声提取温度45℃,提取时间3h,正己烷脱脂,氯化钠饱和后调节pH至7.5,正丁醇/氯仿（1:1,V/V）萃取。3、章鱼不同月份及不同部位的肉碱、章鱼肉碱的含量测定:本实验对章鱼中肉碱及章鱼肉碱的含量进行了初步研究,结果表明不同月份采购的章鱼及章鱼不同部位中肉碱及章鱼肉碱的含量均具有一定差异,其中采收月份和季节是影响其含量的一个主要方面,有待深入研究,为章鱼的开发利用提供依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 章鱼
• 1.1.1 章鱼的营养及药用价值
• 1.1.2 章鱼的应用前景
• 1.2 肉碱的化学结构、生理功能及应用
• 1.2.1 肉碱的化学结构
• 1.2.2 肉碱的生理功能及应用
• 1.3 章鱼肉碱的化学结构，生理功能及应用
• 1.3.1 章鱼肉碱的化学结构
• 1.3.2 章鱼肉碱的生理功能及应用
• 1.4 肉碱、章鱼肉碱常见检测方法
• 1.4.1 高效液相色谱法
• 1.4.2 毛细管电泳
• 1.4.3 酶技术测定法
• 1.4.4 其它测定方法
• 1.5 论文思路
• 第二章 肉碱、章鱼肉碱的高效液相色谱分析方法的建立
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 药品与试剂
• 2.2.2 实验仪器
• 2.3 肉碱、章鱼肉碱的高效液相色谱方法的建立
• 2.3.1 溶液的配制
• 2.3.2 色谱条件
• 2.3.3 标准品的柱前衍生
• 2.3.4 方法学验证
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 色谱条件的选择
• 2.4.2 衍生方法的优化
• 2.4.3 方法学验证
• 2.5 小结
• 第三章 章鱼中肉碱、章鱼肉碱提取方法的优化及含量测定
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料
• 3.2.1 药品与试剂
• 3.2.2 样品来源
• 3.2.3 实验仪器
• 3.3 章鱼中肉碱、章鱼肉碱提取方法的优化及含量测定
• 3.3.1 溶液的配制
• 3.3.2 样品的提取净化及检测
• 3.3.3 提取及净化条件的优化
• 3.3.4 章鱼中肉碱、章鱼肉碱的含量测定
• 3.3.5 方法学验证
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 样品的提取及检测
• 3.4.2 提取条件的优化
• 3.4.3 正交试验设计及结果分析
• 3.4.4 纯化条件的优化
• 3.4.5 方法学验证
• 3.4.6 章鱼中肉碱、章鱼肉碱的含量测定
• 3.5 本章小结
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历
• 发表的学术论文