活血抗生滴丸的工艺、质量标准和抗血管生成作用研究

活血抗生滴丸的工艺、质量标准和抗血管生成作用研究

论文摘要

研究背景:血管生成性疾病包括肿瘤、银屑病、动脉粥样硬化、糖尿病微血管病变、慢性关节炎和子宫内膜异位症等,其发病的特定病理阶段都表现出中医血瘀证的证候特点。桃红四物汤( taohongsiwu decoction , THSWD)是活血化瘀的代表方、基础方。本课题组通过前期工作发现其具有抑制血管生成的作用,并对其进一步精简,得到活血抗生方,拟将其开发成主要用于治疗血管生成性疾病的中药复方新药。国内外目前尚无此制剂的研究和开发的报道。 目的:研究中药复方制剂活血抗生滴丸的制剂工艺、质量标准和抗血管生成作用,为将其开发成抗血管增生新药提供前期工作基础。 方法:采用正交实验设计,以药理学实验、固形物收率和阿魏酸的含量为指标,优选了活血抗生滴丸的提取方法,优化了活血抗生滴丸乙醇回流提取的工艺条件。以阿魏酸和药理指标,考察了提取物的大孔树脂纯化工艺。 采用薄层层析法,鉴别了制剂中的当归、川芎和红花;用高效液相色谱法建立了制剂中阿魏酸含量测定的方法。 通过对 wistar 大鼠海绵模型中组织生长面积和血管密度测定,考察了活血抗生滴丸的抑血管生成作用。 结果:中药饮片用乙醇渗漉法提取,工艺条件为 12 倍量,75%乙醇渗漉,渗漉速度为 3ml/min;选用 D101 型大孔树脂纯化提取物,用1 倍量的树脂吸附,5 倍量的 60%乙醇洗脱,纯化后的提取物和未纯化的乙醇渗漉液作用于 ECV304 细胞,其吸光度(A 值)均显著低于阴性对照组(P<0.05)。 薄层色谱鉴别实验中色谱斑点清晰,分离度好,阴性无干扰。HPLC实验中阿魏酸在 5.2-41.6μg/ml 范围内与峰面积积分值呈现良好的线性关系,r=0.9997;回收率为 100.47%(n=5),RSD=1.38%(n=7);规定阿魏酸含量限度为每克滴丸含阿魏酸不得低于 3mg。 大鼠海绵模型血管生成的实验显示,高剂量(2.50g/kg/d)和中剂量(1.25g/kg/d)用药组 MVD 的抑制率分别为 46.7%和 15.33%,与模型对照组比较有显著性差异。 结论:活血抗生滴丸的制备工艺稳定、可行;TLC 和 HPLC 法可以有效的控制药品的质量。活血抗生滴丸对大鼠的海绵模型有抑制血管生成的作用。 创新及意义:本课题研究以抗血管生成为主要作用的复方中药新药活血抗生滴丸,为制定其制备工艺和质量标准提供了可靠的实验依据。初步的药效学实验证明其有抑制 wistar 大鼠海绵模型中血管生成的作用,具有进一步开发的实用价值。

论文目录

  • 英文缩写
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 正文 活血抗生滴丸的工艺、质量标准和抗血管生成作用研究
  • 前言
  • 第一章 提取物制备工艺研究
  • 第一节、提取工艺选择及优化
  • 第二节、提取物的精制纯化
  • 第三节、活血抗生提取物对 ECV304 细胞增殖的影响
  • 第二章 主要质量标准的研究
  • 第一节、原料药和辅料的质量标准
  • 第二节、薄层色谱(TLC)鉴别
  • 第三节、含量测定
  • 第三章 对大鼠海绵模型血管生成的影响研究
  • 1 材料
  • 2 方法
  • 3 结果
  • 讨论
  • 附图
  • 参考文献
  • 结语
  • 创新及意义
  • 综述:阿魏酸的化学和药理研究进展
  • 致谢
  • 攻读硕士学位期间论文撰写及发表情况
  • 相关论文文献

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