杂色鲍人工雌核发育的研究

论文题目: 杂色鲍人工雌核发育的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 海洋生物学

作者: 蔡明夷

导师: 王桂忠,柯才焕

关键词: 雌核发育,种间杂交

文献来源: 厦门大学

发表年度: 2005

论文摘要: 人工雌核发育技术在育种实践和遗传学基础研究中有着广泛的应用前景,然而贝类人工雌核发育诱导至今还没有真正成功,原因之一是理化方法诱导的贝类雌核后代成活率极低。针对贝类人工雌核发育体成活率低的问题,本研究一方面细致优化了理化方法诱导杂色鲍(Haliotis diversicolor,简为S)雌核发育程序的参数,研究了理化方法诱导杂色鲍雌核发育的细胞机理,为进一步改进杂色鲍雌核发育诱导方法、提高诱导后代成活率奠定了基础;另一方面查实了杂色鲍♀×盘鲍(H. discus discus,简为J)♂种间杂交F1成贝实质上是含有少量父本基因的雌核发育体,并在受精生物学和细胞遗传学研究基础上提出了杂色鲍♀×盘鲍♂产生雌核发育体的机理,为杂色鲍雌核发育诱导提供了新的途径。主要结果和结论如下:1.理化方法诱导杂色鲍雌核发育理化方法诱导杂色鲍雌核发育,利用UV遗传失活精子条件是:光强为1075μW·cm-2·s-1,辐射时间为50~90 sec,受辐射精液浓度为5×106个精子·mL-1,精液厚度为1 mm。杂色鲍雌核发育卵在减数分裂过程中有两个时间点是CB诱导的适宜作用起始时间,分别为0.14倍卵裂时间(T2C)和0.25倍卵裂时间。此外,UV辐射精子,会使精子活力下降、老化速度加快,因此用UV遗传失活精子授精,授精精子浓度应提高到5.7×105~ 4.6×106个精子·mL-1,同时辐射后应尽快用于授精。受精细胞学研究结果表明,理化方法诱导雌核发育卵中,入卵精核在原核期正常形成雄性原核,但雄性原核在第一次卵裂早期退化成浓缩的染色质小体(DCB),表明UV辐射影响了精子染色体的正常浓缩。另外,受精卵经细胞松弛素B诱导后出现减数分裂纺锤体消失、三个原核并存等特殊现象。2.杂色鲍×盘鲍杂交受精条件为了克服配子排放不同步和配子不亲和造成的杂交困难,本研究筛选了杂色鲍精液短期保存条件和杂色鲍×盘鲍授精条件,结果表明,添加3 %DMSO、精液浓度调整为7.5×108个·mL-1、在7℃下保存,可以精子的活力半衰期延长43 h;将授精时间控制在卵子排放5 min内,授精精子浓度控制为自繁的100倍左右,可以将受精率稳定在50%左右。3.杂色鲍×盘鲍杂交F1的生物学表现杂交F1胚胎发育慢于母本。SJ杂交F1成活率约为母本对照组的1.19%。稚贝阶段,正反杂交F1的形态性状(贝壳和齿舌)、数量性状(壳长/壳宽、体重/壳长和体重/壳宽)和生理

论文目录:

摘要

Abstract

第一章绪论

第一节理化方法诱导贝类雌核发育的研究进展

1 精子的遗传失活

2 染色体组加倍

3 遗传鉴定

4 生物学表现

5 细胞学研究

第二节贝类远缘杂交研究进展

1 贝类远缘杂交F1的生物学表现

2 杂交F1的遗传鉴定与分析

3 贝类杂交的受精细胞学研究

4 海洋贝类远缘杂交育种存在的问题与发展方向

第三节研究背景和立题意义

第四节本论文的研究内容和目的

第二章理化方法诱导杂色鲍雌核发育二倍体研究

第一节紫外线辐射对杂色鲍精子功能、胚胎倍性和发育的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第二节理化方法诱导杂色鲍雌核发育二倍体

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第三节理化方法诱导杂色鲍雌核发育受精细胞学研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

本章小结

第三章种间杂交诱导杂色鲍雌核发育的研究

第一节种间杂交授精技术的研究

第1目杂色鲍精子短期保存技术研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第2目杂色鲍与盘鲍杂交受精率的影响因素

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

本节小结

第二节杂色鲍与盘鲍杂交F1的生物学表现

第1目杂色鲍与盘鲍杂交F1胚胎发育速度与成活率

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第2目杂色鲍与盘鲍杂交F1稚贝的生物学表现

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

本节小结

第三节杂色鲍与盘鲍杂交诱导雌核发育体的证实及其机理研究

第1目杂色鲍×盘鲍杂交F1及其亲本自繁群体遗传结构分析

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第2目杂色鲍♀×盘鲍♂杂交家系的AFLP遗传分析

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第3目杂色鲍♀×盘鲍♂杂交的受精细胞学观察

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第4目杂色鲍♀×盘鲍♂杂交F1 及自繁后代幼体的核型分析

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第5目应用GISH研究杂色鲍♀×盘鲍♂杂交幼体基因组组成

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

本节小结

结语

参考文献

在学期间的科研活动和科研成果

致谢

发布时间: 2006-12-11

参考文献

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