2009年中国十二省花生黄曲霉毒素污染调查及脱毒技术研究

论文摘要

黄曲霉毒素(AFT)是由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)等产生的有毒次生代谢产物,广泛存在于花生和玉米等油料作物及其制品中,严重威胁人类和牲畜的健康。世界各国对进口食品中AFT含量的限制标准越来越严格,中国每年因为AFT含量超标遭农产品进口国退货或直接销毁货物损失巨大。中国农产品中AFT限量标准与欧盟等主要农产品进口国制定的标准不一致,也是导致中国农产品出口受阻的重要因素。因此,摸清中国农产品中AFT污染现状,科学制定符合中国国情的AFT限量标准,根据中国实际情况与主要农产品进口国进行对话协商,才能彻底打破农产品进口国家设置的贸易壁垒。本文首次以中国十二个花生主产省2009年收获的花生为研究对象,全面调查了中国花生AFT污染状况。采用免疫亲和的方法提取花生中的AFT；高效液相色谱法检测花生样品中AFT的含量；分析中国几个花生主产区花生AFT污染的状况及其差异；并摸索了化学脱毒剂对花生样品的脱毒效果。得出如下结论：1、通过单因子实验,筛选出花生中AFT最佳提取条件为：花生样品量取5g,提取溶剂为15m170%甲醇,超声器功率50W,超声温度50℃,超声5min,提取液以1.5ml/min速度过免疫亲和柱。2、本文调查结果显示,2009年中国花生AFT污染普遍,即使是作为中国主要花生出口基地的东北产区和北方产区,阳性率也分别高达42.37%和22.40%,长江流域产区花生AFT阳性率为37.83%,南方产区更是高达83.15%。对调查结果的统计分析表明,只有东北产区与长江流域产区阳性率差异不显著(P>0.05),其他各产区之间差异均为极显著(P<0.01),AFT阳性率高低顺序为：南方产区>东北产区/长江流域产区>北方产区；各产区花生AFB1阳性率两两比较结果显示,除东北产区与长江流域产区差异显著外(P<0.05),其他各产区之间均具有极显著性差异(P<0.01),AFB1阳性率高低顺序为南方产区>长江流域产区>东北产区>北方产区。3、以欧盟的花生限量标准为参考,东北产区花生AFT超标率为零,北方产区花生AFT超标率也为0.7%,长江流域和南方产区花生AFT超标率分别为9.29%和4.71%。卡方检验结果表明中国四个产区花生AFT、AFB,超标率差异具有统计学意义。东北产区与北方产区、长江流域产区与南方产区花生AFT、AFB1超标率无显著差异(P>0.05),东北产区与长江流域产区、东北产区与南方产区、北方产区与长江流域产区、北方产区与南方产区花生AFT、AFB1超标率差异极显著(P<0.01)。按欧盟对花生中黄曲霉毒素限量指标,中国花生AFT、AFB1超标率情况为长江流域产区/南方产区显著高于东北产区/北方产区。4、对花生AFB1脱毒技术研究表明,氨水和次氯酸钠对花生中黄曲霉毒素具有很好的去除效果。随着脱毒剂溶液浓度的升高,脱毒效果越好。但浓度升高,对花生的气滋味及色泽改变较大,氨水和次氯酸钠对花生中黄曲霉毒素都具有很好的脱毒效果,相对而言,氨水对花生品质影响较小。次氯酸钠具有强氧化性,对花生中粗脂肪和粗蛋白破坏作用均较大。从研究结果知,2%的氨水和次氯酸钠均能将花生中AFT降低到接近零,而继续增大浓度,次氯酸钠对花生品质破坏明显,氨水虽然对花生蛋白质和含油量影响较小,但浓度增高会影响处理后花生的色泽和气滋味,故建议两种脱毒剂均以2%为最佳脱毒浓度。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 1.1 黄曲霉毒素的研究进展
• 1.1.1 黄曲霉毒素的发生及分布
• 1.1.2 黄曲霉毒素的理化性质及危害
• 1.1.3 黄曲霉毒素导致的食品安全事件
• 1.2 世界各国对花生中黄曲霉毒素的限量标准
• 1.3 黄曲霉毒素超标给中国花生出口带来的影响
• 1.4 黄曲霉毒素的检测技术
• 1.4.1 薄层色谱法（TLC）
• 1.4.2 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.4.3 免疫化学法
• 1.5 黄曲霉毒素（AFT）的脱毒技术
• 1.5.1 物理脱毒
• 1.5.2 化学脱毒
• 1.5.3 中草药法
• 1.5.4 生物脱毒
• 1.6 本课题的研究内容和意义
• 1.6.1 本课题的研究内容
• 1.6.2 本课题的研究意义
• 第二部分 材料与方法
• 2.1 样品收集整理
• 2.1.1 采样地区
• 2.1.2 采样方法
• 2.2 样品检测材料的准备
• 2.2.1 检测仪器
• 2.2.2 检测用试剂
• 2.2.3 溶液的配置
• 2.3 检测方法：免疫亲和柱（IAC）-荧光光度法
• 2.3.1 免疫亲和柱的制备
• 2.3.2 近红外光谱测定
• 2.3.3 柱容量的测定
• 2.3.4 前处理方法
• 2.3.5 回收率、重复性及灵敏度的测定
• 2.3.6 HPLC条件
• 2.4 待检测花生样品的制备
• 2.5 花生样品的检测
• 第三部分 结果与分析
• 3.1 花生样品的收集与整理
• 3.2 免疫亲和柱的制备
• 3.3 样品前处理条件优化
• 3.3.1 不同取样量比较
• 3.3.2 提取溶剂浓度与用量
• 3.3.3 超声温度、时间和功率的选择
• 3.3.4 样品净化方式
• 3.4 根据前处理条件优化结果形成的前处理方法
• 3.5 基于自制免疫亲和柱的HPLC方法的重复性、灵敏度以及回收率的测定
• 3.5.1 重复性
• 3.5.2 灵敏度
• 3.5.3 回收率的测定比较
• 3.5.4 HPLC检测图谱
• 3.6 检测结果
• 1'>3.6.1 AFB₁
• 3.6.2 黄曲霉毒素总量
• 3.6.3 全国花生黄曲霉毒素阳性率差异分析
• 3.6.4 全国花生黄曲霉毒素污染超标率差异分析
• 第四部分 花生黄曲霉毒素的脱毒技术研究
• 4.1 实验材料与方法
• 4.1.1 实验试剂与样品
• 4.1.2 实验仪器
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 对染毒花生的脱毒处理
• 4.2.2 黄曲霉毒素的提取
• 4.2.3 检测方法
• 4.3 脱毒效果分析
• 4.3.1 直接作用于毒素时脱毒剂浓度与脱毒效果的关系
• 4.3.2 花生基质中氨水的脱毒效果
• 4.4 脱毒剂对花生品质的影响
• 4.4.1 脱毒剂对花生含油量的影响
• 4.4.2 脱毒剂对花生粗蛋白的影响
• 4.4.3 脱毒剂对花生外观的影响
• 第五部分 讨论与展望
• 5.1 讨论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 致谢