（哈尔滨市道外区卫生保健院黑龙江哈尔滨150020）
【摘要】探讨临床微生物检验中尿液标本的采集和运送。正常人的尿液是无菌的，更好地从尿道发现细菌并减少可能的污染，必须要注意严格无菌操作收集尿液标本，尿液标本必须使用专用无菌容器，并加盖送检，并在培养时进行活菌计数。树立标本质量控制意识，注意无菌操作，尽快送检或妥善保存。
【关键词】临床微生物检验；尿液标本；采集；运送处理
【中图分类号】R197.32【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）07-0207-01
正常情况下，从肾脏分泌出来的尿液是无菌的，但尿液流经尿道及尿道口时会被尿道及尿道口的正常菌群污染，为了更好地从尿道发现细菌并减少可能的污染，必须要注意严格无菌操作收集尿液标本，并在培养时进行活菌计数。
1.标本的采集和运送
1.1采集方法
采集消毒中段尿，最好留取早晨消毒中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约10～20ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检，2h内接种[1]。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，但要注意导尿容易引起逆行性感染。
1.2采集容器的要求
洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏、广口、盒盖易于开启，不含防腐剂和抑菌剂。
1.3标本运送
标本采集后应及时送检、及时接种，室温下保存时间不得超过2h（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存），4℃冷藏保存时间不得超过8h，但应注意淋病奈瑟菌培养时标本不能冷藏保存。
2.尿液标本保存
尿标本留取后应及时送检，以免细菌繁殖及有形成分破坏。凡留尿超过2小时、未注明留尿时间及尿量不够的标本应拒收。检验科收到合格的尿标本后应签收，在送检单上注明收到时间，并应及时检查[2]。膀胱穿刺尿做厌氧培养时，应避免接触空气，针头插上灭菌橡皮塞，立即送检。尿液标本如不能立即送检，则必须保存于4～8℃冰箱，时间不超过6h。
3.标本的处理
实验室收到标本后，立即进行处理。
3.1直接涂片检查
以无菌操作将尿液5～7ml，放入无菌试管中，3000r/min离心沉淀30min，倾上清，取沉淀物制成薄片1～2张，供染色用。
3.1.1一般细菌涂片作革兰染色，镜检，根据结果做出初步报告。
3.1.2淋病奈瑟菌取尿沉淀涂片2张，进行革兰染色和吕氏亚甲蓝染色，镜检如发现肾形双球菌，革兰阴性存在于细胞内或细胞外，经培养证实后方可报告。
3.1.3结核分枝杆菌尿液4000r/min30min离心，取沉淀物涂片2张，分别用萋－尼抗酸染色和潘本汉抗酸染色，如两张片均见红色杆菌，报告“找到分枝杆菌”。如萋－尼染色见红色杆菌，而潘本汉染色未见红色杆菌，则为耻垢分枝杆菌。亦可用金胺O－罗丹明荧光染色法进行检查。
3.1.4念珠菌沉淀物作湿片，覆盖盖玻片，以高倍镜检查。如沉淀太多，可加10%氢氧化钾使之溶解后再镜检。同时制成薄片，干燥固定后，革兰染色，油镜镜检。如发现透亮芽生孢子和假菌丝，并经革兰染色检查见革兰阳性酵母样细胞时，可报告检出念珠菌。
3.1.5钩端螺旋体取发病1周后的尿液沉淀物，滴于载玻片上，覆以盖玻片后于暗视野镜检，如发现一串亮珠而两端呈钩状且沿纵轴旋转运动的螺旋体时，可报告检出螺旋体。
3.2细菌培养
现临床上多选中段尿培养，并作尿液菌落计数，才有临床诊断意义。
3.2.1一般细菌培养血平板和中国蓝／麦康凯平板是基本的分离培养基。取标本沉淀物接种于上述平板作普通培养（有条件的实验室对用过抗生素的患者，尿培养须接种高渗培养基，培养L－型细菌）[3]。按照其生长现象、菌落特征、生化反应、染色反应等等，鉴定后发出检验报告。孵育48h后未见生长可报告：“培养两日无细菌生长”。
3.2.2尿定量培养平板接种法用无菌微量进样器取稀释尿液5μl滴注在血平板培养基上呈一条直线，用接种环沿直线左右划线，从上到下一次完成，不可来回划线和分区划线，或用3mm直径定量接种环（有商业供应）取尿液标本划线于血平板上。定量接种后，35℃孵育，计数其生长菌落数乘以稀释系数，即可得到每毫升尿液菌落数。若培养后菌落多得无法计数时，则可报告细菌培养大于105CFU/ml。
3.2.3特殊细菌培养结核分枝杆菌、厌氧菌、钩端螺旋体、淋病奈瑟菌、念珠菌等培养。
4.讨论
临床细菌学检验工作中，正确选择、采集和运送标本，是检验结果准确、有效的前提，是实验室质量保证的重要环节。标本采集应遵循适时采集、无菌采集、及时送检、合理保存、安全运送等原则[4]。各种临床标本细菌学检验的基本方法包括：肉眼观察标本、标本直接镜检、分离培养与菌落特征观察、生化鉴定、血清学鉴定、药敏试验等。检验结果根据分级报告制度，及时作出初步报告和确诊报告。
中段尿液标本需进行活菌计数，帮助判断分离的细菌是污染菌还是感染菌。临床医师必须在充分认识尿液一般检验各项目临床意义的基础上，将尿液标本留取的方法告诉患者，获取高质量，无人为干扰的尿标本。检验人员必须建立实验室规范统一的操作步骤，以尿液全面质量控制为前提，充分考虑影响每项检验结果的各项因素；从标本采集、转运、处理、检测直到报告结果等各个环节都予以严格的关注，并制定相应的措施。
【参考文献】
[1]周文宾,谷小林.尿液标本采集处理有规可依——《尿液标本的收集和处理指南》标准解读[J].中国卫生标准管理,2012,4(1):30-37.
[2]孙武.浅述尿检测标本的质控措施[J].中国卫生产业,2012(28).
[3]吕海超.临床微生物标本采集对微生物检验结果的重要性[J].医药,2017(1):00288-00288.
[4]潘秀贤,黄花新.提高临床微生物标本采集质量的探讨[J].护士进修杂志,2003,18(9):799-800.