本文主要研究内容
作者庞明,董佳易,倪思璐,管雄,张煜琛,陈德坤（2019）在《奶山羊IL-6与TGF-β1融合蛋白的制备及其活性检测》一文中研究指出：【目的】制备具有免疫活性的奶山羊白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)与转移生长因子-β1(Transfer growth factor-β1,TGF-β1)融合蛋白。【方法】采集奶山羊外周血,分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),将PBMCs用刀豆蛋白A(ConA)刺激后提取其总RNA,RT-PCR扩增IL-6与TGF-β1基因,构建其克隆载体及原核表达载体pET-32a-TGF-β1和pET-32a-IL-6,然后进行PCR和测序鉴定。将原核表达载体pET-32a-TGF-β1和pET-32a-IL-6转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,以镍柱纯化试剂盒纯化IL-6与TGF-β1重组蛋白,对表达产物和纯化后的蛋白进行SDS-PAGE。用纯化的IL-6、TGF-β1蛋白刺激PBMCs,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH基因为内参,采用qRT-PCR法检测PBMCs IL-17 mRNA的表达量。【结果】RT-PCR扩增获得了627 bp的IL-6基因片段和1 137 bp的TGF-β1基因片段,成功构建了IL-6和TGF-β1基因的克隆载体及pET-32a-TGF-β1和pET-32a-IL-6原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中得到成功表达;获得了纯化的奶山羊IL-6与TGF-β1融合蛋白,该融合蛋白联合刺激能使PBMCs的IL-17 mRNA表达水平显著升高。【结论】获得了具有免疫活性的奶山羊IL-6与TGF-β1重组蛋白。
Abstract
【mu de 】zhi bei ju you mian yi huo xing de nai shan yang bai xi bao jie su 6(Interleukin-6,IL-6)yu zhuai yi sheng chang yin zi -β1(Transfer growth factor-β1,TGF-β1)rong ge dan bai 。【fang fa 】cai ji nai shan yang wai zhou xie ,fen li wai zhou xie chan ge he xi bao (Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs),jiang PBMCsyong dao dou dan bai A(ConA)ci ji hou di qu ji zong RNA,RT-PCRkuo zeng IL-6yu TGF-β1ji yin ,gou jian ji ke long zai ti ji yuan he biao da zai ti pET-32a-TGF-β1he pET-32a-IL-6,ran hou jin hang PCRhe ce xu jian ding 。jiang yuan he biao da zai ti pET-32a-TGF-β1he pET-32a-IL-6zhuai hua zhi da chang gan jun BL21(DE3)zhong ,yong IPTGyou dao biao da ,yi nie zhu chun hua shi ji he chun hua IL-6yu TGF-β1chong zu dan bai ,dui biao da chan wu he chun hua hou de dan bai jin hang SDS-PAGE。yong chun hua de IL-6、TGF-β1dan bai ci ji PBMCs,yi gan you quan -3-lin suan tuo qing mei GAPDHji yin wei nei can ,cai yong qRT-PCRfa jian ce PBMCs IL-17 mRNAde biao da liang 。【jie guo 】RT-PCRkuo zeng huo de le 627 bpde IL-6ji yin pian duan he 1 137 bpde TGF-β1ji yin pian duan ,cheng gong gou jian le IL-6he TGF-β1ji yin de ke long zai ti ji pET-32a-TGF-β1he pET-32a-IL-6yuan he biao da zai ti ,bing zai da chang gan jun BL21(DE3)zhong de dao cheng gong biao da ;huo de le chun hua de nai shan yang IL-6yu TGF-β1rong ge dan bai ,gai rong ge dan bai lian ge ci ji neng shi PBMCsde IL-17 mRNAbiao da shui ping xian zhe sheng gao 。【jie lun 】huo de le ju you mian yi huo xing de nai shan yang IL-6yu TGF-β1chong zu dan bai 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自西北农林科技大学学报(自然科学版)的庞明,董佳易,倪思璐,管雄,张煜琛,陈德坤，发表于刊物西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年11期论文，是一篇关于奶山羊论文,白细胞介素论文,转移生长因子论文,融合蛋白论文,西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年11期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：奶山羊论文; 白细胞介素论文; 转移生长因子论文; 融合蛋白论文; 西北农林科技大学学报(自然科学版)2019年11期论文;