鼠李糖脂生产条件优化及对液态发酵中微生物产酶的影响

论文摘要

通过正交试验,确定了铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa AB93066)产生物表面活性剂鼠李糖脂的最佳培养条件。在此最佳培养条件下,通过在发酵液中加入高效悬浮大孔载体,在几乎相等的成本下提高了铜绿假单胞菌产鼠李糖脂的量。实验结果表明,在发酵液中加入载体后,铜绿假单胞菌的生物量相对于对照提高了12.1%,鼠李糖脂的产量提高了51.2%,鼠李糖脂最大产量的时间段为48～60h。用柱层析提纯的方法对产生的鼠李糖脂粗提物进行分离提纯得到鼠李糖脂单糖脂和二糖脂,得到的二糖脂用于后续实验。将二糖脂应用于液态发酵中黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶、锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Lac)、纤维素酶(CMCase)、木聚糖酶(xylanase)的影响的研究,并与阴离子化学表面活性剂十二烷基磺酸钠的作用效果进行了比较,得到了一些有用的信息。结果表明:不同浓度的二鼠李糖脂的加入对纤维素酶、木聚糖酶、LiP酶活有促进作用,对木聚糖酶及LiP酶活的促进作用尤为明显,而对MnP酶活却有抑制作用,表明二鼠李糖脂对同一种菌产不同酶的酶活的影响是不同的。整个发酵培养过程中,在浓度为0.013%的二鼠李糖脂的作用下,LiP酶活有非常明显的提高,其峰值比对照高出61.98%。两种浓度的化学表面活性剂十二烷基磺酸钠的加入对纤维素酶、木聚糖酶、LiP及MnP酶活的提高不起作用或有抑制作用,对纤维素酶活的抑制作用最为明显。不同处理情况下黄孢原毛平革菌产漆酶的量非常少。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 插图索引
• 附表索引
• 第1 章 绪论
• 1.1 堆肥微环境中生物表面活性剂的引入
• 1.2 生物表面活性剂的生产及合成
• 1.2.1 生物表面活性剂的生产
• 1.2.2 生物表面活性剂的合成
• 1.3 生物表面活性剂的性质
• 1.3.1 生物表面活性剂的物理性质
• 1.3.2 生物表面活性剂的化学性质
• 1.4 生物表面活性剂的性能和特性
• 1.4.1 生物表面活性剂的性能
• 1.4.2 生物表面活性剂的特性
• 1.4.3 生物表面活性剂--鼠李糖脂的基本特性
• 1.5 生物表面活性剂的分离提纯
• 1.5.1 萃取
• 1.5.2 结晶与沉淀
• 1.5.3 泡沫层析法
• 1.5.4 超滤法
• 1.5.5 柱色谱
• 1.6 生物表面活性剂在环境工程中的应用
• 1.6.1 在石油开采业中的应用（MEOR 技术）
• 1.6.2 在水处理中的应用
• 1.6.3 生物表面活性剂对重金属的吸附
• 1.6.4 在堆肥中的应用
• 1.6.5 在土壤修复中的应用
• 1.7 本研究课题的来源及主要研究内容
• 第2 章 生物表面活性剂高产实验研究
• 2.1 生物表面活性剂高产菌的获取背景知识
• 2.1.1 诱变技术在筛选生物表面活性剂高产菌中的应用
• 2.1.2 载体的加入在获取生物表面活性剂高产菌中的应用
• 2.2 引言
• 2.3 实验目的
• 2.4 实验材料及试剂
• 2.4.1 菌种及载体
• 2.4.2 实验试剂
• 2.4.3 实验器材
• 2.4.4 实验菌种培养基
• 2.5 实验方法
• 2.5.1 菌种活化与保藏
• 2.5.2 P.a A893066 最佳培养条件的确定
• 2.5.3 表面张力的测定
• 2.5.4 菌体吸光度的测定
• 2.5.5 鼠李糖脂的生产及提取
• 2.5.6 加载体生产鼠李糖脂
• 2.6 结果与讨论
• 2.6.1 正交试验结果及分析
• 2.6.2 高效悬浮大孔载体的用量对鼠李糖脂产量的影响
• 2.6.3 载体的加入对菌体吸光度的影响
• 2.6.4 加载体与不加载体上清液表面张力值随时间的变化情况
• 2.7 结论
• 第3 章 鼠李糖脂二糖脂对液态发酵中黄孢原毛平革菌产酶的影响
• 3.1 表面活性剂对微生物产酶及纤维素降解的促进作用的综述
• 3.1.1 表面活性剂对产纤维素酶法水解的促进作用
• 3.1.2 表面活性剂对微生物产酶量的促进作用
• 3.2 引言
• 3.3 实验目的
• 3.4 实验材料及试剂
• 3.4.1 菌种来源
• 3.4.2 主要试剂
• 3.4.3 实验器材
• 3.4.4 实验用培养基
• 3.5 实验方法
• 3.5.1 鼠李糖脂的生产及分离提纯
• 3.5.2 菌悬液的制备
• 3.5.3 二鼠李糖脂及SDS 对液态发酵中黄孢原毛平革菌产酶的影响
• 3.5.4 酶活的测定
• 3.6 实验结果
• 3.6.1 二鼠李糖脂及SDS 对黄孢原毛平革菌产纤维素酶的影响
• 3.6.2 二鼠李糖脂及SDS 对黄孢原毛平革菌产木聚糖酶的影响
• 3.6.3 二鼠李糖脂及SDS 对黄孢原毛平革菌产漆酶的影响
• 3.6.4 二鼠李糖脂及SDS 对黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶的影响
• 3.6.5 二鼠李糖脂及SDS 对黄孢原毛平革菌产锰过氧化物酶的影响
• 3.7 讨论
• 3.8 结论
• 结论与研究展望
• 结论
• 认识和展望
• 参考文献
• 致谢
• 附录 攻读学位期间发表论文及专利情况
• 论文情况
• 专利情况