论文摘要
志贺菌属是导致感染性腹泻的常见致病菌之一。随着抗生素的广泛应用,志贺菌耐药情况日趋严重,给临床治疗带来严峻挑战。目前研究表明,横向获得外源性耐药基因是大多数细菌产生耐药性特别是多重耐药（multidrug resistance,MDR）的主要原因之一。近年来国内外研究发现,在细菌,尤其是革兰氏阴性菌中,一种可以捕获并表达耐药基因的新型克隆表达系统——整合子（integron，In）在细菌耐药基因水平转移机制中起了重要作用。整合子主要由整合酶（integrase）基因（intI）、整合酶特异性重组位点attI和数目不定的耐药基因盒（gene cassette）组成。耐药基因盒由一个编码抗生素抗性的开放读码框（open reading frame,ORF）和一个整合位点attC组成,可以环形结构独立存在,也可整合入整合子中而成为整合子结构的一部分。目前研究表明,1、2类整合子与志贺菌多重耐药密切相关。研究目的：分析天津地区志贺菌流行菌株血清型、抗生素耐药情况及耐药变化趋势；研究1、2类整合子在天津地区志贺菌中检出率及分布规律,分析其与志贺菌抗生素耐药的相关性。材料与方法：对收集的志贺菌临床株162株,其中129株（福氏志贺菌24株、宋内志贺菌104株、鲍氏志贺菌1株）为2009和2010年5-9月从天津市三家三级甲等医院肠道门诊患者粪便标本中分离的志贺菌临床株及本研究所保存的33株（福氏志贺菌32株、宋内志贺菌1株）分离自1981—1983年天津地区多家三级甲等医院的志贺菌临床株,采用K-B法用16种临床常用抗生素进行药物敏感试验,分析其耐药变化趋势,并通过PCR基因扩增技术对1、2类整合子在志贺菌中的分布情况、携带的耐药基因盒的种类及与耐药的相关性进行研究。结果：1981—1983年组志贺菌对四环素耐药率最高,为93.94%,其次是氯霉素、链霉素、甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑,对3种及3种以上抗生素耐药多重耐药菌株占全部菌株的66.67%（22/33）,未发现三代头孢菌素、氟喹诺酮类药物及亚胺培南耐药菌株；2009—2010年组志贺菌对氨苄西林耐药率最高,为97.67%,其次是甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑、哌拉西林、四环素、链霉素和庆大霉素,3种及3种以上抗生素多重耐药菌株为93.02%（120/129）,对三代头孢菌素及氟喹诺酮类药物耐药率分别为3.88-12.40%、1.55-2.33%,未发现亚胺培南耐药株；1981—1983年组1类整合子阳性率为87.88%（29/33）,27株可变区含氨基糖苷类药物耐药基因aadA；1株宋内志贺菌可变区含甲氧苄啶耐药基因dfrA17和氨基糖苷类药物耐药基因aadA5；未发现2类整合子阳性株；2009—2010年组1类整合酶阳性率为73.64%（95/129）,可变区及3’末端扩增均阴性,基因盒扩增显示21株blαoχα-30和aadA阳性,17株dfrA12扩增阳性；2类整合子阳性率62.79%（81/129）,可变区含dfrAl+satl+aadAl,介导甲氧苄啶、链丝菌素和链霉素耐药；其中62株1、2类整合酶同时阳性。1类整合子阳性组对链霉素和氯霉素的耐药率明显高于1类整合子阴性组（P<0.05）；2类整合子阳性组志贺菌属对氨苄西林、哌拉西林、链霉素、庆大霉素和甲氧苄啶/磺胺甲噁哗的耐药率均明显高于2类整合子阴性组（P<0.05）。结论：天津地区志贺菌流行株主要是宋内志贺菌和福氏志贺菌,多重耐药率达93.02%。1类整合子广泛存在于志贺菌属中；2类整合子仅由2009—2010年组志贺菌中检出。整合子与志贺菌耐药具有相关性,1、2类整合子的耐药相关有重叠性。