论文摘要
前言 有证据表明,基因亚型的遗传学差别对产生不同的临床结局具有重要作用,特别是Hp致病相关基因如:cagA、vacA和iceA等的差异,与感染的临床结局密切相关。辽宁庄河是我国北方的胃癌高发区,本室前期工作发现当地Hp检出率为60.70%,与胃癌低发区之间差异显著,辽宁省庄河、沈阳两地幽门螺杆菌菌株基因型的分布存在明显差异,胃癌高低发区幽门螺杆菌差异基因型组合为cagA+,vacAs1+/m1b+。研究提示,庄河地区的胃癌高发与Hp感染有关系,是否是由于差异基因型导致庄河地区胃癌的高发,还不清楚。本研究观察了庄河胃癌高低发区差异基因型Hp菌株对永生化的非肿瘤胃上皮细胞GES-1的损伤作用,明确差异基因型Hp的致病能力,并比较不同基因亚型Hp对GES-1细胞的损伤作用,并检测了共培养后GES-1细胞中8-OHdG的表达,以阐明其Hp致胃上皮细胞DNA损伤乃至恶性转化的分子机制。 实验方法 本试验在微需氧的条件下,进行幽门螺杆菌的培养,并用标准的酚-氯仿方法提取菌种DNA后经聚合酶链反应及琼脂糖凝胶电泳对cagA、vacAs1、s2、m1a、m1b、m2基因亚型进行检测,根据PCR结果,进行实验分组:A组:GES-1细胞与cagA+,vacAs1+/m1b+型Hp共培养,B组:GES-1细胞与cagA+,vacAs1-/m1b-型Hp共培养,C组GES-1细胞与cagA-,vacAs1+/m1b+型Hp共培养,D组细胞只加PBS作为空白对照。在37℃,5%CO2,饱和湿度的环境培养GES-1细胞,利用细胞和幽门螺杆菌共培养技术,观察胃癌高低发区差异基因亚型Hp以及其他两种非差异基因型Hp对
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