本文主要研究内容
作者孙清扬,张静静,李冰清,王岩,张晓华（2019）在《金属离子对重组深渊滕黄单胞菌低温α-淀粉酶LamA的活性和稳定性影响》一文中研究指出：【背景】深渊藤黄单胞菌XH031 (Luteimonas abyssi XH031)是从深海分离到的一株具有很强淀粉降解能力的细菌,前期实验显示其α-淀粉酶LamA在低温环境下仍能保持较高酶活力。若能够提升其热稳定性,会有更好的应用前景。【目的】分析钙离子的存在对LamA热稳定性的影响,并通过钙离子结合位点的关键氨基酸的定点突变,初步明确其作用机制。【方法】在不同的离子条件下检测LamA的热稳定性,利用生物信息学方法预测可能影响钙离子结合及耐热性的氨基酸位点,对目的氨基酸进行定点突变,表达和纯化突变蛋白,并进行功能鉴定。【结果】钙离子明显提高了LamA的热稳定性:在未添加钙离子时,于65°C处理30 min已完全失活;而在5 mmol/L钙离子条件下,于65°C处理30 min后仍具有36%的酶活力。对预测位点进行定点突变后,突变蛋白D200R和H233D/M234C完全失活;N120D、Q185E和T224D活性降低。在未添加钙离子时,突变蛋白稳定性受高温影响程度与野生型差别不大;而在钙离子条件下,N120D在65°C时的酶活力仅为野生型的27.8%,推测位点Asn120与钙离子的结合能够稳定低温酶LamA在较高温度下的结构。【结论】初步明确了钙离子可提升低温α-淀粉酶LamA的热稳定性,为今后相关酶类的工程改造提供理论基础。
Abstract
【bei jing 】shen yuan teng huang chan bao jun XH031 (Luteimonas abyssi XH031)shi cong shen hai fen li dao de yi zhu ju you hen jiang dian fen jiang jie neng li de xi jun ,qian ji shi yan xian shi ji α-dian fen mei LamAzai di wen huan jing xia reng neng bao chi jiao gao mei huo li 。re neng gou di sheng ji re wen ding xing ,hui you geng hao de ying yong qian jing 。【mu de 】fen xi gai li zi de cun zai dui LamAre wen ding xing de ying xiang ,bing tong guo gai li zi jie ge wei dian de guan jian an ji suan de ding dian tu bian ,chu bu ming que ji zuo yong ji zhi 。【fang fa 】zai bu tong de li zi tiao jian xia jian ce LamAde re wen ding xing ,li yong sheng wu xin xi xue fang fa yu ce ke neng ying xiang gai li zi jie ge ji nai re xing de an ji suan wei dian ,dui mu de an ji suan jin hang ding dian tu bian ,biao da he chun hua tu bian dan bai ,bing jin hang gong neng jian ding 。【jie guo 】gai li zi ming xian di gao le LamAde re wen ding xing :zai wei tian jia gai li zi shi ,yu 65°Cchu li 30 minyi wan quan shi huo ;er zai 5 mmol/Lgai li zi tiao jian xia ,yu 65°Cchu li 30 minhou reng ju you 36%de mei huo li 。dui yu ce wei dian jin hang ding dian tu bian hou ,tu bian dan bai D200Rhe H233D/M234Cwan quan shi huo ;N120D、Q185Ehe T224Dhuo xing jiang di 。zai wei tian jia gai li zi shi ,tu bian dan bai wen ding xing shou gao wen ying xiang cheng du yu ye sheng xing cha bie bu da ;er zai gai li zi tiao jian xia ,N120Dzai 65°Cshi de mei huo li jin wei ye sheng xing de 27.8%,tui ce wei dian Asn120yu gai li zi de jie ge neng gou wen ding di wen mei LamAzai jiao gao wen du xia de jie gou 。【jie lun 】chu bu ming que le gai li zi ke di sheng di wen α-dian fen mei LamAde re wen ding xing ,wei jin hou xiang guan mei lei de gong cheng gai zao di gong li lun ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自微生物学通报的孙清扬,张静静,李冰清,王岩,张晓华，发表于刊物微生物学通报2019年11期论文，是一篇关于海洋酶资源论文,作用机制论文,淀粉酶论文,离子依赖论文,热稳定性增强论文,微生物学通报2019年11期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自微生物学通报2019年11期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：海洋酶资源论文; 作用机制论文; 淀粉酶论文; 离子依赖论文; 热稳定性增强论文; 微生物学通报2019年11期论文;