苗药黑骨藤的生药学以及化学成分研究

论文摘要

本文对苗药黑骨藤（Periploca forrestii Schltr）进行了生药学研究并对其化学成分进行了TLC薄层色谱和HPLC指纹图谱研究。在生药学研究中采集四川以及贵州两省的黑骨藤原植物标本,对其标本进行石蜡切片观察,对黑骨藤的西昌原产地药材进行粉末观察和化学鉴定。黑骨藤原植物的显微特点:其叶为①上表皮细胞一列,类方形或长方形;下表皮细胞一列,类圆形,细胞稍小,少见气孔。②栅栏组织一列,圆柱形,通过中脉;海绵组织类圆形,排列疏松;均含叶绿体。③外韧型维管束。木质部向茎面,导管单列,放射状排列成5～7列;韧皮部在下,其外侧有细胞壁稍薄的纤维束环绕。④在主脉的上、下表皮内侧有1～2列厚角组织⑤栅栏组织中可见草酸钙簇晶。根和茎的特点为木栓层为15-30列或更多列木栓细胞组成,其内侧有2-3列扁平薄壁细胞构成木栓形成层区,再向内则为栓内层,由4-9列细胞组成,细胞中含有少量淀粉粒有的细胞中含1-2个草酸钙结晶。韧皮部有石细胞群散在韧皮射线有1-5列细胞,细胞壁薄性,内含有较多淀粉粒,少数细胞含1-2个草酸钙棱晶。粉末观察的特点为草酸钙结晶呈棱形或方形,长10-35μm。淀粉粒单粒呈三角形,椭圆形、半圆形或葫芦形,直径3-16μm,复粒由2-4个分粒组成。石细胞黄色,多边形或方形,长16-51μm,胞腔及壁孔明显,胞壁厚10-16μm。导管多具缘纹孔,少数网纹,直径27-180μm。黑骨藤化学成分的分离:黑骨藤根茎的乙醇浸提物经过萃取分为石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分、正丁醇部分和水五个部分,经过反复硅胶柱层析、薄层层析等方法分离纯化得到黑骨藤氯仿提取物、乙酸乙酯提取物的最佳薄层色谱分离方法。氯仿提取物的分离方法是以硅胶为固定相,以乙酸乙酯和石油醚（1:15）为展开剂,得到9个分离点;乙酸乙酯提取物的分离方法是以硅胶为固定相,以乙酸乙酯和石油醚（1:10）为展开剂,得到7个分离点。在薄层色谱分离条件的基础上,用硅胶柱色谱对氯仿提取物进行分离。硅胶柱色谱的分离条件是色谱柱为Ф1.5×30cm,洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚（1:15）,在此条件下,得到三个片段的物质。将第一个片段的物质用Ф1.2×50cm的硅胶柱,经乙酸乙酯和石油醚（1:50）洗脱,并通过不同比例的乙酸乙酯、石油醚、氯仿和正丁醇等展开剂的的薄层色谱的分离得到三个纯化合物,对这三个纯化合物进行了紫外和红外光谱测定。黑骨藤原植物提取液的HPLC指纹图谱:建立其梯度洗脱的方法学,对贵州和四川5个产地的原植物提取液进行指纹图谱的对比发现氯仿层中有7个较大的共有峰;乙酸乙酯层中有11个较大共有峰,这可以作为黑骨藤的特征峰,结果发现,不同产地的样品有一定的相似性,但也有所不同,可以作为该植物的资源开发的质量标准。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 杠柳属植物研究概况
• 1.1.1 杠柳属植物药理学研究进展
• 1.1.2 黑骨藤药理作用研究进展
• 1.2 杠柳属植物概况
• 1.3 杠柳属植物的结构和特点
• 1.4 杠柳属植物化学成分研究进展
• 1.4.1 杠柳属植物的主要化学成分
• 1.4.2 黑骨藤化学成分研究进展
• 1.5 苗药黑骨藤研究开发情况
• 1.6 药用植物生药学研究
• 1.6.1 基源学研究
• 1.6.2 药材的观察和鉴定
• 1.7 中药化学成分研究
• 1.7.1 中药化学成分提取
• 1.7.2 化学成分的分离与纯化
• 1.8 中药指纹图谱概况
• 1.9 中药指纹图谱的研究方法
• 1.10 本文研究目的和意义
• 1.11 实验方案
• 2 苗药黑骨藤生药学的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.3 实验结果
• 2.3.1 石蜡切片实验结果
• 2.3.1.1 叶横切显微特征
• 2.3.1.2 根、茎横切显微特征
• 2.3.2 粉末观察实验结果
• 2.3.2.1 药材性状
• 2.3.2.2 药材粉末观察特征
• 2.3.2.3 化学鉴定实验结果
• 2.4 讨论
• 2.4.1 石蜡切片实验讨论
• 2.4.1.1 实验方法的选择
• 2.4.1.2 实验条件的选择
• 2.4.1.3 各产地显微切片对比
• 2.5 小结
• 3 黑骨藤化学成分研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 实验仪器
• 3.2.3 化学试剂
• 3.2.4 样品前处理及提取
• 3.2.5 化学成分提取实验
• 3.2.5.1 冷凝回流法提取
• 3.2.5.2 萃取法提取
• 3.2.6 黑骨藤化学成分分离和纯化实验
• 3.2.6.1 黑骨藤化学成分的薄层色谱研究
• 3.2.6.2 黑骨藤化学成分的柱色谱分离
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 氯仿提取物 TLC 分离结果
• 3.3.2 乙酸乙酯提取物 TLC 分离结果
• 3.3.3 柱色谱纯纯化合物的确定
• 3.3.4 柱色谱纯化合物的初步结构鉴定
• 3.3.4.1 纯化合物的紫外光谱图
• 3.3.4.2 纯化合物的红外光谱图
• 3.4 小结
• 4 黑骨藤指纹图谱研究
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 实验仪器
• 4.2.2 实验试剂
• 4.2.3 实验材料
• 4.2.4 实验方法
• 4.2.4.1 色谱条件
• 4.2.4.2 实验材料的处理
• 4.2.4.3 供试品溶液的制备
• 4.2.4.4 空白实验
• 4.2.5 方法学的考察
• 4.2.5.1 精密度实验
• 4.2.5.2 稳定性实验
• 4.2.5.3 重现性实验
• 4.2.5.4 相对保留时间、峰面积比值计算
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 检测波长的选择
• 4.3.2 流动相的确定
• 4.3.3 柱温的选择
• 4.3.4 精密度实验
• 4.3.5 稳定性实验
• 4.3.6 重现性实验
• 4.3.7 不同地区的黑骨藤指纹图谱
• 4.4 小结
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 研究生在校期间的研究成果