淄博地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星的耐药性及parC基因突变的检测

论文摘要

目的 了解淄博地区淋球菌耐药性及parC基因变异情况,研究其与耐环丙沙星之间的关系。为探索建立快速、有效的淋球菌耐药菌株基因检测方法提供依据。 方法 集51例淄博地区淋病奈瑟菌感染病例标本,通过淋球菌培养、琼脂平板稀释法测定环丙沙星对淋病奈瑟菌最小抑菌浓度MICs,选取高水平耐环丙沙星淋病奈瑟菌菌株（MICs≥4.0μg/ml）30株,设计对应于淋球菌parC基因的PCR引物,通过PCR其目的基因片段并进行DNA序列分析,明确parC基因突变的位点。 结果 51株淋球菌临床分离株对环丙沙星的耐药率为88.24%。3株敏感菌株及30株高水平耐药菌株均经PCR扩增出parC基因片段（255bp）,3株敏感菌株测序未发现核苷酸的错义突变,也未见氨基酸的任何突变。测序成功的24株高水平耐药菌株中有22株分别发生1-3个氨基酸的突变,分别在Asp-86→Asn、Ser-87→Asn、Ser-88→Pro、Glu-91→Lys发生基因突变。以Asp-86→Asn突变最为常见,有19株,占测序成功的高水平耐药菌株的79.17% 结论 淄博地区的淋球菌临床分离株对环丙沙星耐药率较高。高水平耐环丙沙星淋球菌parC基因突变呈现多样性。应用PCR和基因测序技术可快速准确检测parC基因的突变,弥补常规药敏试验的不足。

论文目录

• 引言
• 第一章 材料和方法
• 1.1 标本收集
• 1.2 主要试剂及药品
• 1.3 主要仪器
• 1.4 主要试剂配制
• 1.5 实验方法
• 第二章 结果
• 2.1 药敏试验结果
• 2.2 PCR扩增产物电泳分析结果
• 2.3 parC基因序列分析结果
• 第三章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 攻读学位期间研究成果
• 附录
• 致谢
• 声明