RNA干扰SUMO1基因对结肠癌Hct116细胞生物学行为的影响

论文摘要

消化道肿瘤是人类最常见的恶性肿瘤之一,位于癌症死亡的第一位。结肠癌是最常见的消化道肿瘤之一,具有恶性程度高、复发率高、预后差的特点。目前临床所见绝大多数结肠癌为晚期病例,根治切除率低和5年生存率低,总体疗效较差。结肠癌的发生、发展是多因素多级多步骤的过程,随着对分子生物学理论和技术的不断进步,结肠癌的分子机制和基因治疗成为结肠癌治疗领域的热点。SUMO1是近几年发现的一种约12kD的小蛋白,并引起广泛的关注。SUMO1和SUMO1介导的类泛素化一经发现便成为信号转导等领域的研究热点。RNA干扰是一种真核生物体内的基因调控机制,是内源性或外源性双链RNA介导的同源基因序列降解的过程；利用RNAi技术的基因沉默效应,可特异性的抑制癌基因、癌相关基因或突变基因等的表达。目前,通过构建载体表达产生的短发夹RNA转染目标细胞使目标基因沉默,从而达到抑制肿瘤生长的目的,逐步成为肿瘤学和基因学的研究热点之一。本研究成功筛选出高表达SUMO1的结肠癌细胞株,通过构建pshRNA-SUMO1表达载体并转染到结肠癌细胞Hct116中,检测其对结肠癌细胞SUMO1内源性表达的抑制作用,并观察对结肠癌细胞生长、增殖、运动性以及对P53表达的影响；建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察转染pshRNA-SUMO1对结肠癌Hct116细胞成瘤力的抑制作用。本研究验证了通过抑制SUMO1的表达可以抑制结肠癌细胞的肿瘤生物学行为,为选择SUMO1作为结肠癌治疗靶点提供了理论依据。

论文目录

• 前言
• 内容提要
• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩写词
• 第1篇 文献综述
• 第1章 RNAi的研究进展与问题
• 1 RNAi的发现
• 2 RNAi的作用机制
• 3 目前所用的RNAi模板分类
• 4 RNAi的作用特点
• 5 RNAi技术要点
• 6 RNAi技术的应用
• 7 问题与展望
• 第2章 SUMO化修饰与肿瘤
• 1 SUMO的发现和组成
• 2 SUMO化过程
• 3 SUMO的生物学效应
• 4 SUMO与肿瘤
• 5 前景与展望
• 第2篇 实验研究
• 第1章 SUMO1阳性表达结肠癌细胞株的筛选
• 1 实验材料和设备
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第2章 pshRNA-SUMO1重组质粒的构建和鉴定以及对SUMO1表达的影响
• 1 实验材料和设备
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第3章 pshRNA-SUMO1重组质粒对结肠癌细胞生物学行为及 P53表达的影响
• 1 实验材料和设备
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第4章 pshRNA-SUMO1重组质粒对裸鼠结肠癌种植瘤的影响
• 1 实验材料和设备
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 小结
• 第3篇 结论
• 参考文献
• 作者简介及在学期间所取得的科研成果
• 致谢