Treg/Th17和Tfh细胞在骨髓衰竭性疾病中变化的意义

论文摘要

目的：（1）检测骨髓增生异常综合征（MDS）、再生障碍性贫血（AA）和免疫相关性血细胞减少症（IRH）患者骨髓中CD4+T细胞中Foxp3和RORγt的表达水平；分析调节性T细胞（Treg）、Th17细胞和Treg/Th17在这些疾病中变化的意义。（2）检测IRH患者骨髓中CD4+T细胞中Bcl-6的表达水平，分析滤泡辅助性T细胞（Tfh）在IRH患者中变化的意义。方法：（1）收集2011年1月-2012年3月在苏州大学附属第一医院门诊或住院病房二系或三系血细胞减少患者和缺铁性贫血（IDA）患者骨髓10ml，肝素抗凝。IDA患者作为正常对照组。（2）密度梯度离心分离骨髓单个核细胞（BMMNC），免疫磁珠分选CD4+T细胞。抽提CD4+T细胞中的总mRNA并逆转成cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应（QRT-PCR）（TagMan）检测Treg细胞转录因子Foxp3，Th17细胞转录因子RORγt，以及Tfh细胞主要转录因子Bcl-6的mRNA表达水平。（3）收集所有患者的病史和临床资料，对疾病进行明确诊断。（4）在MDS患者中，采用直线回归分析方法分析Treg、Th17细胞和Treg/Th17与骨髓原始细胞比例之间的相互关系。（5）采用两样本均值比较的t检验分析AA和IRH患者与正常对照组之间Treg/Th17的差异。（6）采用两样本均值比较的t检验分析IRH和正常对照组之间Bcl-6表达的差异。结果：（1）MDS患者中，Treg/Th17与骨髓原始细胞比例高度相关（r=0.793）。（2）MDS患者中，骨髓原始细胞≥5%的MDS患者Th17细胞水平明显低于＜5%的患者（p=0.007）。（3）难治/复发AA患者的Treg/Th17明显低于正常对照组和初诊AA组（p=0.006；p<0.001）。（4）IRH组，Tfh细胞高于正常对照组（p=0.016），Treg/Th17高于正常对照组（p=0.045）；（5）IRH组Th17细胞明显低于AA组（p<0.001）；Treg/Th17明显高于AA组（p=0.002）。结论：（1）MDS患者，Treg/Th17和骨髓原始细胞高低正相关，提示Th17细胞免疫功能受抑与MDS疾病的进展有关。（2）难治/复发AA患者，Treg/Th17失衡，细胞免疫功能亢进。（3）IRH的免疫学发病机制和AA不同，以Tfh细胞升高为主导。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 引言
• 1.1 TH17 细胞的概述
• 1.2 TREG 细胞的概述
• 1.3 TREG 细胞和 TH17 细胞的分化网络
• 1.4 TFH 细胞概述
• 1.5 本实验的研究目的、材料和方法、实验设计和研究意义
• 第二部分 实验过程
• 2.1 标本、临床资料的收集，疾病的明确诊断
• 2.2 材料和方法
• 2.3 实验步骤
• 2.4 结果
• 第三部分 结论和讨论
• 3.1 TREG、TH17 和 TREG/TH17 与骨髓增生异常综合征
• 3.2 TREG/TH17 与再生障碍性贫血
• 3.3 TREG/TH17，TFH 细胞与免疫相关性血细胞减少症
• 参考文献
• 综述
• 摘要
• 参考文献
• 已发表和待发表的文章
• 致谢