三疣梭子蟹同工酶的生化遗传分析

论文摘要

本文应用垂直平板高不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）的肌肉、心脏、眼睛（包括眼柄）、鳃、肝胰腺和卵巢等6种组织中ADH、MDH、LDH、GOT、GDH、α—AMY、SOD、EST、SDH和ME等10种同工酶的表达情况,在此基础上研究分析了三疣梭子蟹胚胎和幼体发育过程中同工酶表达的变化,对三疣梭子蟹东海群体同工酶的遗传变异情况进行了初步分析。 通过对肌肉、心脏、眼睛（包括眼柄）、鳃、肝胰腺和卵巢等6种组织中ADH、MDH、LDH、GOT、GDH、α—AMY、SOD、EST、SDH和ME等10种同工酶的组织特异性研究发现,三疣梭子蟹组织中具有较为完善的同工酶系统。除SDH外,其余同工酶都存在不同程度的组织特异性,而且同一种酶在不同的组织中的活性强弱也有差异。同工酶的组织特异性不仅反映了不同组织不同的生理功能,而且表明基因在表达时具有空间特性。 在分析三疣梭子蟹同工酶表达的组织特异性的基础上,对三疣梭子蟹东海群体的遗传变异情况进行了同工酶的初步分析,检测了ADH、MDH、LDH、GOT、GDH、α—AMY、SOD、EST、SDH和ME等10种同工酶在肌肉、肝胰腺和卵巢中的表达情况。结果表明,在所分析的22个基因位点中只有EST—3位点表现为多态,其余皆为单态。以P0.99为标准,该群体的平均多态位点比例为4.5%,群体平均每个位点的杂合度观察值为0,而群体平均每个位点的预期杂合度为0.007,表明三疣梭子蟹群体的遗传变异水平比较低。 本文还研究分析了三疣梭子蟹个体发育早期（从未受精卵到第一期幼蟹）11种同工酶（LDH、GDH、ADH、SOD、EST、ME、MDH、SDH、GOT、ACP和α-AMY）的酶谱变化情况。结果表明,三疣梭子蟹EST、ME、MDH、SDH、GOT、ACP和α-AMY等7种同工酶电泳图谱显示了明显的发育阶段差异性,大都随发育渐趋复杂。个

论文目录

• 中文文摘
• 英文文摘
• 0 前言
• 1 文献综述
• 1.1 同工酶技术的应用概况
• 1.1.1 种质资源研究和分类鉴定
• 1.1.2 群体生化遗传研究
• 1.1.3 细胞分化和个体发育研究中的应用
• 1.1.4 同工酶表达的组织特异性分析
• 1.1.5 病害的诊断和防治
• 1.2 三疣梭子蟹的研究概况
• 1.2.1 生长、发育和生殖习性的研究
• 1.2.2 组织、生理和营养成分研究
• 1.2.3 细胞学和遗传学研究
• 1.2.4 繁殖生物学研究
• 2 三疣梭子蟹不同组织同工酶的分析
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料来源
• 2.1.2 酶提取缓冲液的筛选
• 2.1.3 样品的提取
• 2.1.4 聚丙烯酰胺凝胶的制备
• 2.1.5 加样
• 2.1.6 电泳
• 2.1.7 染色和拍照
• 2.2 结果
• 2.3 小结与讨论
• 2.3.1 三疣梭子蟹同工酶表达的组织特异性
• 2.3.2 乳酸脱氢酶在三疣梭子蟹及其他蟹类组织中的表达差异
• 2.3.3 三疣梭子蟹卵巢组织中的同工酶表达及生理意义
• 3 东海群体三疣梭子蟹同工酶的生化遗传分析
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料来源
• 3.1.2 样品的提取、电泳和染色
• 3.1.3 电泳数据的处理与分析
• 3.2 结果
• 3.2.1 三疣梭子蟹群体同工酶的表达
• 3.2.2 三疣梭子蟹群体的遗传变异参数
• 3.3 小结与讨论
• 3.3.1 等位基因频率和基因型频率
• 3.3.2 杂合度和遗传偏离指数
• 3.3.3 三疣梭子蟹种质资源状况分析
• 4 三疣梭子蟹个体发育早期的同工酶谱变化
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料来源
• 4.1.2 方法
• 4.2 结果
• 4.3 小结与讨论
• 4.3.1 三疣梭子蟹同工酶带的分类
• 4.3.2 三疣梭子蟹同工酶的个体发生多态性
• 4.3.3 关于刚孵化的三疣梭子蟹第一期蚤状幼体的同工酶活性
• 参考文献
• 附录
• 致谢