王雅:纳米银暴露对发育早期斑马鱼的神经毒性效应研究论文

王雅:纳米银暴露对发育早期斑马鱼的神经毒性效应研究论文

本文主要研究内容

作者王雅(2019)在《纳米银暴露对发育早期斑马鱼的神经毒性效应研究》一文中研究指出:由于纳米银(AgNPs)是目前市场上应用最广泛的金属纳米材料,商品化产品几乎无处不在。AgNPs的大量生产和广泛应用使其向环境释放的机会增加,同时也增加了人体暴露的风险。因此,AgNPs对生物及生态系统的影响日益受到关注。为了研究AgNPs暴露对发育早期斑马鱼(Danio rerio)的神经毒性效应,本硕士学位论文首先建立了AgNPs暴露的斑马鱼模型,用不同浓度PVP包裹的粒径为20 nm的AgNPs(0μg/L、200μg/L、400μg/L、600μg/L、800μg/L和1000μg/L)暴露斑马鱼胚胎7 d,通过体视显微镜观察记录斑马鱼发育早期的死亡率、孵化率、心率和畸形率,计算出AgNPs的半致死浓度。从生理学、形态学层面探究AgNPs对斑马鱼早期生长发育的毒性影响;然后,通过比较不同浓度AgNPs(0μg/L,400μg/L,600μg/L,800μg/L和1000μg/L)处理后斑马鱼5种候选内参基因(gapdh、ef1α、β-actin、rpl7和rnf7)的mRNA表达变化,筛选出表达相对稳定的内参基因,为不同浓度AgNPs暴露下斑马鱼目的基因相对表达量的分析奠定基础;最后,采用实时荧光定量PCR方法检测GABA受体通路相关基因(gabra1、gat1、abat和gad1b)的mRNA表达量,从γ-氨基丁酸(GABA)代谢及其受体角度探讨AgNPs诱导的神经毒性效应。实验结果如下:1.将斑马鱼胚胎在不同浓度的AgNPs溶液中暴露7 d,统计死亡率,计算得出AgNPs暴露96 h的半数致死浓度(LC50)为1380.94μg/L,168 h的LC50为1216.13μg/L。与对照组相比,AgNPs暴露后斑马鱼的生存率、孵化率、心率和畸形率等指标,均发生显著性变化(p<0.05),并呈浓度依赖效应;在幼鱼发育的不同时期,斑马鱼出现色素发育异常、小眼、心包水肿、卵黄囊水肿、脊柱弯曲等畸形形态。2.本实验选用了NormFinder、geNorm和BestKeeper 3种软件对斑马鱼幼鱼的5种候选内参基因(gapdh、ef1α、β-actin、rpl7和rnf7)的稳定性进行了评价,通过综合评价法分析得出内参基因稳定性的排序为:β-actin>gapdh>rnf7>rpl7>ef1α,其中表达最稳定的内参基因是β-actin。3.AgNPs暴露可使斑马鱼幼鱼GABA受体通路相关基因(gabra1、gat 1、abat和gad1b)的mRNA表达发生变化。AgNPs暴露7 d后,与对照组相比,低浓度组abat mRNA表达显著上调(p<0.05),gat1则在所有浓度组均显著上调(p<0.05);gabra1 mRNA表达量在高浓度组极显著下降(p<0.01);gad1b mRNA表达量无显著变化。综上所述,AgNPs可对斑马鱼胚胎发育产生影响,并且能够影响斑马鱼幼鱼GABA受体通路相关基因(gabra1、gat1、abat和gad1b)的表达调控。

Abstract

you yu na mi yin (AgNPs)shi mu qian shi chang shang ying yong zui an fan de jin shu na mi cai liao ,shang pin hua chan pin ji hu mo chu bu zai 。AgNPsde da liang sheng chan he an fan ying yong shi ji xiang huan jing shi fang de ji hui zeng jia ,tong shi ye zeng jia le ren ti bao lou de feng xian 。yin ci ,AgNPsdui sheng wu ji sheng tai ji tong de ying xiang ri yi shou dao guan zhu 。wei le yan jiu AgNPsbao lou dui fa yo zao ji ban ma yu (Danio rerio)de shen jing du xing xiao ying ,ben shuo shi xue wei lun wen shou xian jian li le AgNPsbao lou de ban ma yu mo xing ,yong bu tong nong du PVPbao guo de li jing wei 20 nmde AgNPs(0μg/L、200μg/L、400μg/L、600μg/L、800μg/Lhe 1000μg/L)bao lou ban ma yu pei tai 7 d,tong guo ti shi xian wei jing guan cha ji lu ban ma yu fa yo zao ji de si wang lv 、fu hua lv 、xin lv he ji xing lv ,ji suan chu AgNPsde ban zhi si nong du 。cong sheng li xue 、xing tai xue ceng mian tan jiu AgNPsdui ban ma yu zao ji sheng chang fa yo de du xing ying xiang ;ran hou ,tong guo bi jiao bu tong nong du AgNPs(0μg/L,400μg/L,600μg/L,800μg/Lhe 1000μg/L)chu li hou ban ma yu 5chong hou shua nei can ji yin (gapdh、ef1α、β-actin、rpl7he rnf7)de mRNAbiao da bian hua ,shai shua chu biao da xiang dui wen ding de nei can ji yin ,wei bu tong nong du AgNPsbao lou xia ban ma yu mu de ji yin xiang dui biao da liang de fen xi dian ding ji chu ;zui hou ,cai yong shi shi ying guang ding liang PCRfang fa jian ce GABAshou ti tong lu xiang guan ji yin (gabra1、gat1、abathe gad1b)de mRNAbiao da liang ,cong γ-an ji ding suan (GABA)dai xie ji ji shou ti jiao du tan tao AgNPsyou dao de shen jing du xing xiao ying 。shi yan jie guo ru xia :1.jiang ban ma yu pei tai zai bu tong nong du de AgNPsrong ye zhong bao lou 7 d,tong ji si wang lv ,ji suan de chu AgNPsbao lou 96 hde ban shu zhi si nong du (LC50)wei 1380.94μg/L,168 hde LC50wei 1216.13μg/L。yu dui zhao zu xiang bi ,AgNPsbao lou hou ban ma yu de sheng cun lv 、fu hua lv 、xin lv he ji xing lv deng zhi biao ,jun fa sheng xian zhe xing bian hua (p<0.05),bing cheng nong du yi lai xiao ying ;zai you yu fa yo de bu tong shi ji ,ban ma yu chu xian se su fa yo yi chang 、xiao yan 、xin bao shui zhong 、luan huang nang shui zhong 、ji zhu wan qu deng ji xing xing tai 。2.ben shi yan shua yong le NormFinder、geNormhe BestKeeper 3chong ruan jian dui ban ma yu you yu de 5chong hou shua nei can ji yin (gapdh、ef1α、β-actin、rpl7he rnf7)de wen ding xing jin hang le ping jia ,tong guo zeng ge ping jia fa fen xi de chu nei can ji yin wen ding xing de pai xu wei :β-actin>gapdh>rnf7>rpl7>ef1α,ji zhong biao da zui wen ding de nei can ji yin shi β-actin。3.AgNPsbao lou ke shi ban ma yu you yu GABAshou ti tong lu xiang guan ji yin (gabra1、gat 1、abathe gad1b)de mRNAbiao da fa sheng bian hua 。AgNPsbao lou 7 dhou ,yu dui zhao zu xiang bi ,di nong du zu abat mRNAbiao da xian zhe shang diao (p<0.05),gat1ze zai suo you nong du zu jun xian zhe shang diao (p<0.05);gabra1 mRNAbiao da liang zai gao nong du zu ji xian zhe xia jiang (p<0.01);gad1b mRNAbiao da liang mo xian zhe bian hua 。zeng shang suo shu ,AgNPske dui ban ma yu pei tai fa yo chan sheng ying xiang ,bing ju neng gou ying xiang ban ma yu you yu GABAshou ti tong lu xiang guan ji yin (gabra1、gat1、abathe gad1b)de biao da diao kong 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自山西大学的王雅,发表于刊物山西大学2019-11-12论文,是一篇关于纳米银论文,神经毒性论文,受体通路论文,斑马鱼论文,山西大学2019-11-12论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自山西大学2019-11-12论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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