血府逐瘀胶囊的活性物质基础和重楼皂苷的定量分析

论文摘要

本论文主要对血府逐瘀胶囊及其主要药味枳壳、桃仁的化学成分及入血成分进行了研究,以期找到血府逐瘀胶囊的活性成分。首先,利用LC-MS技术对胶囊及枳壳、桃仁的化学成分进行了研究;然后,根据血清药物化学的原理,通过检测口服给药后大鼠血浆中的化学成分寻找其活性成分,结果如下:1.成功建立了UPLC-PDA-Q-TOF/MS的方法,在枳壳水提液中鉴定并归属了12种黄酮苷类化合物,9种多甲基羟基黄酮类化合物;在大鼠血清中检测到6个原型成分和4个代谢成分。在大鼠体内检测到柚皮苷、新橙皮苷、柚皮素葡萄糖醛酸苷和橙皮素葡萄糖醛酸苷,说明柚皮苷和新橙皮苷是枳壳的主要活性成分,这两种化合物在体内以原型和代谢物的形式发挥作用。2.利用HPLC技术测定了大鼠口服枳壳水提液后柚皮苷和新橙皮苷的药时曲线,计算了半衰期等参数,阐述了枳壳药材在大鼠体内的药物代谢动力学过程。3.首次利用UPLC-PDA-Q-TOF/MS技术在桃仁水提液中鉴定了11个化学成分,其中包括2个黄酮苷柚皮苷和山奈酚-3-O-芸香糖苷,苏氨酸、绿原酸、（+）-儿茶素和6个氰苷类成分。在大鼠口服桃仁水提液后的血清中检测到6个成分,其中2个为原型成分苦杏仁苷和野樱苷,2个苦杏仁苷的代谢产物。结果显示,桃仁中的氰苷类成分尤其是苦杏仁苷是其活性成分。4.首次利用LC-MS技术在血府逐瘀胶囊中鉴定出24个化合物,其中包括8个黄酮及黄酮苷类成分,3个萜类皂苷,9个四氯苯酞类化合物,1个氰苷,1个单查尔酮苷类,1个有机酸和1个核苷,并对各个化合物的来源进行了归属。在给药血清样品中检测到苦杏仁苷、柚皮苷及其代谢产物、新橙皮苷及其代谢产物等。本实验结果丰富了血府逐瘀胶囊的化学成分,明确了其中的部分活性成分。另外,本论文的另一部分是关于重楼皂苷有效部位质量控制的研究,成功建立了一测多评的方法同时测定重楼皂苷有效部位中的5种甾体皂苷。以重楼皂苷I为指标,计算了与其他4种甾体皂苷之间的校正因子。通过不同实验条件的验证,此方法稳定性好（RSD=0.884.52%）,具有广泛的应用性,能够用于重楼药材及其皂苷有效部位的质量控制研究。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 血府逐瘀胶囊简介
• 1.2 血府逐瘀胶囊主要药味活性成分的研究
• 1.2.1 桃仁
• 1.2.2 红花
• 1.2.3 赤芍
• 1.2.4 川芎
• 1.2.5 柴胡
• 1.2.6 当归
• 1.2.7 枳壳
• 1.2.8 桔梗
• 1.2.9 地黄
• 1.2.10 甘草
• 1.2.11 牛膝
• 1.3 血府逐瘀胶囊活性成分的研究
• 1.4 本论文研究目的及意义
• 第二章 枳壳活性成分的UPLC-PDA-Q-TOF/MS 分析
• 2.1 引言
• 2.2 实验仪器与材料
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.2 实验仪器
• 2.2.3 药品和试剂
• 2.2.4 实验动物
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 色谱条件
• 2.3.2 质谱条件
• 2.3.3 给药样品的制备
• 2.3.4 给药方案与血样采集
• 2.3.5 血浆样品前处理
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 实验条件的优化
• 2.4.2 标准品的质谱分析
• 2.4.3 枳壳水提液化学成分的质谱分析
• 2.4.4 枳壳口服给药后入血成分的质谱分析
• 2.5 小结
• 第三章 口服枳壳后大鼠体内柚皮苷和新橙皮苷的药代动力学研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验仪器与材料
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 实验仪器
• 3.2.3 药品和对照品
• 3.2.4 实验动物
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 色谱条件
• 3.3.2 标准品配置
• 3.3.3 给药样品的制备
• 3.3.4 给药方案与血样采集
• 3.3.5 血浆样品的前处理
• 3.3.6 血浆标准曲线制备
• 3.3.7 数据处理
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 色谱分析
• 3.4.2 标准曲线
• 3.4.3 精密度和回收率试验
• 3.4.4 血药浓度—时间曲线
• 3.4.5 药代动力学研究
• 3.5 小结
• 第四章 桃仁活性成分的UPLC-PDA-Q-TOF/MS 分析
• 4.1 引言
• 4.2 实验仪器与材料
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 实验仪器
• 4.2.3 药品和试剂
• 4.2.4 实验动物
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 色谱条件
• 4.3.2 质谱条件
• 4.3.3 给药样品的制备
• 4.3.4 给药方案与血样采集
• 4.3.5 血浆样品前处理
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 桃仁水提液中化学成分的质谱分析
• 4.4.2 桃仁口服给药后入血成分的质谱分析
• 4.5 小结
• 第五章 血府逐瘀胶囊活性成分的LC-MS 分析
• 5.1 引言
• 5.2 实验仪器与材料
• 5.2.1 实验材料
• 5.2.2 实验仪器
• 5.2.3 药品和试剂
• 5.2.4 实验动物
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 HPLC-ESI-MS 色谱条件
• 5.3.2 HPLC-ESI-MS 质谱条件
• 5.3.3 UPLC-PDA-Q-TOF/MS 色谱条件及质谱条件
• 5.3.4 样品制备
• 5.3.5 给药方案与血样采集
• 5.3.6 血浆样品的前处理
• 5.4 结果与讨论
• 5.4.1 实验条件的优化
• 5.4.2 血府逐瘀胶囊化学成分的HPLC-ESI-MS 分析
• 5.4.3 血府逐瘀胶囊口服给药后入血成分的 UPLC-PDA-Q-TOF
• 5.5 小结
• 第六章 重楼皂苷有效部位甾体皂苷的含量测定
• 6.1 前言
• 6.2 实验仪器与材料
• 6.3 实验方法
• 6.3.1 方法原理
• 6.3.2 色谱条件
• 6.3.3 对照品溶液的制备
• 6.3.4 供试品溶液的制备
• 6.4 结果与讨论
• 6.4.1 线性范围
• 6.4.2 校正因子
• 6.4.3 精密度试验
• 6.4.4 稳定性试验
• 6.4.5 重现性试验
• 6.4.6 加样回收率试验
• 6.4.7 有效部位各甾体皂苷的含量测定
• 6.5 小结
• 第七章 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 致谢