佟鹤：金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的构建及其免疫保护效应的初步研究论文

本文主要研究内容

作者佟鹤（2019）在《金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的构建及其免疫保护效应的初步研究》一文中研究指出：金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是人畜共患病原菌,能够引起菌血症、中毒性休克综合征、心内膜炎、骨髓炎和肺炎等多种疾病。自20世纪60年代以来,随着耐药性金黄色葡萄球菌菌株的出现,给金葡菌治疗带来了严峻的挑战。疫苗接种是预防或治疗S.aureus感染的有效手段之一,然而目前尚无安全有效S.aureus疫苗问世。因此,开发能够预防S.aureus感染的疫苗迫在眉睫。本研究选取S.aureus表面蛋白TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2作为候选抗原,分别构建上述抗原重组表达载体,诱导表达并纯化目的蛋白。将目的蛋白配伍弗氏佐剂分别免疫小鼠,ELISA法检测小鼠血清中的抗体水平。在末次免疫后,将金葡菌通过滴鼻的方式进行攻毒,检测各组小鼠的体温变化、肺脏病理变化、肺部载菌量及存活率,明确各蛋白的免疫保护效果。结果表明,成功构建TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2蛋白的重组表达载体,经诱导表达纯化,获得纯蛋白。与PBS对照组相比较,TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2抗原都能显著提高小鼠血清中特异性IgG抗体滴度;在攻毒实验中,TraP、Csa1、Rap、MntC、GapC抗原能够提高小鼠对金葡菌的抵抗能力,各组小鼠存活率如下:TraP为80%、Efb为20%、Csa1为80%、Rap为60%、Mntc为80%、Gapc为60%、FhuD2为30%。接下来选取免疫保护效果为80%以上的抗原作为候选抗原(TraP、Csa1、Mntc),将上述三种抗原等比例混合后配伍乳酸菌多糖佐剂EPS29、EPS30,制备成多抗原混合疫苗,并分别对小鼠进行免疫,ELISA法检测小鼠血清中的特异性抗体及其亚型水平。末次免疫后,将金葡菌通过滴鼻的方式进行攻毒,检测各组小鼠体温变化、肺脏病理变化、肺部载菌量及存活率。结果发现:与PBS组、EPS29组、EPS30组、TraP+Csa1+Mntc组相比较,TraP+Csa1+Mntc+CFA/IFA、TraP+Csa1+Mntc+EPS29、TraP+Csa1+Mntc+EPS30免疫组能够提高小鼠对金葡菌的抵抗能力,并且能够减少金葡菌在肺部的定植;TraP+Csa1+Mntc+CFA/IFA、TraP+Csa1+Mntc+EPS29、TraP+Csa1+Mntc+EPS030免疫组均能显著提高小鼠血清中特异性IgG抗体以及IgG抗体亚类IgG1、IgG2a和IgG2b的抗体滴度;同时能够促进细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-17的分泌。本研究为研发S.aureus新型基因工程疫苗提供理论依据和实验数据。

Abstract

jin huang se pu tao qiu jun (Staphylococcus aureus)shi ren chu gong huan bing yuan jun ,neng gou yin qi jun xie zheng 、zhong du xing xiu ke zeng ge zheng 、xin nei mo yan 、gu sui yan he fei yan deng duo chong ji bing 。zi 20shi ji 60nian dai yi lai ,sui zhao nai yao xing jin huang se pu tao qiu jun jun zhu de chu xian ,gei jin pu jun zhi liao dai lai le yan jun de tiao zhan 。yi miao jie chong shi yu fang huo zhi liao S.aureusgan ran de you xiao shou duan zhi yi ,ran er mu qian shang mo an quan you xiao S.aureusyi miao wen shi 。yin ci ,kai fa neng gou yu fang S.aureusgan ran de yi miao pai zai mei jie 。ben yan jiu shua qu S.aureusbiao mian dan bai TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2zuo wei hou shua kang yuan ,fen bie gou jian shang shu kang yuan chong zu biao da zai ti ,you dao biao da bing chun hua mu de dan bai 。jiang mu de dan bai pei wu fu shi zuo ji fen bie mian yi xiao shu ,ELISAfa jian ce xiao shu xie qing zhong de kang ti shui ping 。zai mo ci mian yi hou ,jiang jin pu jun tong guo di bi de fang shi jin hang gong du ,jian ce ge zu xiao shu de ti wen bian hua 、fei zang bing li bian hua 、fei bu zai jun liang ji cun huo lv ,ming que ge dan bai de mian yi bao hu xiao guo 。jie guo biao ming ,cheng gong gou jian TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2dan bai de chong zu biao da zai ti ,jing you dao biao da chun hua ,huo de chun dan bai 。yu PBSdui zhao zu xiang bi jiao ,TraP、Efb、Csa1、Rap、MntC、GapC、FhuD2kang yuan dou neng xian zhe di gao xiao shu xie qing zhong te yi xing IgGkang ti di du ;zai gong du shi yan zhong ,TraP、Csa1、Rap、MntC、GapCkang yuan neng gou di gao xiao shu dui jin pu jun de di kang neng li ,ge zu xiao shu cun huo lv ru xia :TraPwei 80%、Efbwei 20%、Csa1wei 80%、Rapwei 60%、Mntcwei 80%、Gapcwei 60%、FhuD2wei 30%。jie xia lai shua qu mian yi bao hu xiao guo wei 80%yi shang de kang yuan zuo wei hou shua kang yuan (TraP、Csa1、Mntc),jiang shang shu san chong kang yuan deng bi li hun ge hou pei wu ru suan jun duo tang zuo ji EPS29、EPS30,zhi bei cheng duo kang yuan hun ge yi miao ,bing fen bie dui xiao shu jin hang mian yi ,ELISAfa jian ce xiao shu xie qing zhong de te yi xing kang ti ji ji ya xing shui ping 。mo ci mian yi hou ,jiang jin pu jun tong guo di bi de fang shi jin hang gong du ,jian ce ge zu xiao shu ti wen bian hua 、fei zang bing li bian hua 、fei bu zai jun liang ji cun huo lv 。jie guo fa xian :yu PBSzu 、EPS29zu 、EPS30zu 、TraP+Csa1+Mntczu xiang bi jiao ,TraP+Csa1+Mntc+CFA/IFA、TraP+Csa1+Mntc+EPS29、TraP+Csa1+Mntc+EPS30mian yi zu neng gou di gao xiao shu dui jin pu jun de di kang neng li ,bing ju neng gou jian shao jin pu jun zai fei bu de ding zhi ;TraP+Csa1+Mntc+CFA/IFA、TraP+Csa1+Mntc+EPS29、TraP+Csa1+Mntc+EPS030mian yi zu jun neng xian zhe di gao xiao shu xie qing zhong te yi xing IgGkang ti yi ji IgGkang ti ya lei IgG1、IgG2ahe IgG2bde kang ti di du ;tong shi neng gou cu jin xi bao yin zi IFN-γ、IL-4he IL-17de fen bi 。ben yan jiu wei yan fa S.aureusxin xing ji yin gong cheng yi miao di gong li lun yi ju he shi yan shu ju 。

论文参考文献

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论文详细介绍

论文作者分别是来自内蒙古大学的佟鹤，发表于刊物内蒙古大学2019-08-13论文，是一篇关于金黄色葡萄球菌论文,表面蛋白论文,混合疫苗论文,乳酸菌胞外多糖论文,内蒙古大学2019-08-13论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自内蒙古大学2019-08-13论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。

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