论文摘要
本文用来自蜜蜂分泌的蜂王浆喂养果蝇,研究和检测蜂王浆对果蝇生长发育、寿命和老化的的影响,并且探讨了造成影响的原因。天然来源的许多成分复杂的物质,经常被用来预防和治疗疾病。这些物质多数来自植物,少数来自动物和真菌。正因为成分是混合的,给分析其机理带来不少困难。这可以从两个方面给以解决,一方面用这种混合物在动物上进行试验,看是否有某种功效,就会为人类使用这些物质作一参考。另一方面,将混合物所含成分进行解析,可以是分离检测或根据已有数据的分析,来确定主要成分的多少,将各主要组分的确定功能叠加起来,就能大体上看出这一混合物的功能如何。我们研究蜂王浆就是沿着这个思路进行的。首先做的是果蝇培养和生活史观察,熟悉其生活习性,为以后的实验打下基础。我们在参阅已有文献的基础上,作了较为详细的观察。先前设想蜂王浆既然可以改变蜜蜂的生长、发育和寿命,也将在果蝇中得以体现。随后用培养瓶进行了羽化以后的寿命实验,将果蝇的雌蝇和雄蝇在含蜂王浆与不含蜂王浆的培养基分别培养,观察和记录果蝇的死亡情况,以存活率对时间作图,得出果蝇生存的趋势线,比较出蜂王浆有无延长果蝇寿命的效果。结果发现,蜂王浆延长了雌蝇的平均寿命,没有延长雄蝇的平均寿命,并且曲线的形状在用蜂王浆喂养的实验组中有所变化。可知蜂王浆的确对果蝇寿命有所影响。接下来,用培养管做了果蝇从产卵到羽化的实验,测试蜂王浆对果蝇幼虫的生长影响。产卵后即在实验组加入蜂王浆,对照组未加蜂王浆,然后观察和记录果蝇羽化时间,在加入与不加蜂王浆实验的基础上,并且改变了酵母的含量,在蜂王浆和酵母间也作一比较。从开始羽化后的几天时间里,比较了开始羽化的时间和羽化量最多的一天。发现蜂王浆的确使羽化时间和羽化量最多时间提前,同时酵母也有一定作用。可知蜂王浆对果蝇生长有所影响。后来的实验研究了果蝇体内酶活性和丙二醛含量的高低。设想蜂王浆既然能表现为改变生长与寿命的作用,也必然可以改变果蝇体内的生化指标,即酶活性及其它小分子的量的高低。用培养瓶培养羽化后的果蝇,每隔一段时间每瓶取出存活的果蝇25只,余者继续培养。测定不同时间收集的果蝇体内SOD、CAT比活性和MDA含量,在添加蜂王浆培养的果蝇与未添加的培养果蝇间作比较。用的是果蝇的匀浆后的上清液。结果确实发现了一定的差异。与寿命的变化基本相符合,从而进一步证实了我们的预想。可能的机制是,蜂王浆的加入改变了抗氧化酶活性,然后由SOD和CAT去减少MDA的含量。在解释结果时使用已有资料进行蜂王浆成分剖析,把组分与生理意义对应起来,找出产生结果的原因是蜂王浆有某些成分,而某些成分又恰好具有这些作用,使果蝇的生长、发育和老化状况得到改变,可能也改变了生长、发育和老化过程的激素信号。蜂王浆含有的王浆蛋白质、肽类、激素、酶、脂肪酸和多量维生素等可能起到重要作用。这可为蜂王浆的生产和利用提供一定的参考依据。在前言中介绍前人已取得的研究成果,介绍蜂王浆的部分研究结果,介绍生长发育尤其是老化的有关内容,并对模式生物果蝇做了基础介绍,包括果蝇的遗传操作。为了能在分子水平上开展工作,我们对于果蝇基因的染色体定位克隆方法,以及用到的一些遗传操作方法作了认真的介绍,给出典型的实例,包括抗氧化酶过氧化氢酶的例子,以利于今后同行开展类似工作。