基质金属蛋白酶-1基因沉默抑制人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞ACC-M侵袭转移的研究

基质金属蛋白酶-1基因沉默抑制人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞ACC-M侵袭转移的研究

论文题目: 基质金属蛋白酶-1基因沉默抑制人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞ACC-M侵袭转移的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 口腔医学

作者: 朱秀丽

导师: 吴军正

关键词: 基因芯片,人涎腺腺样囊性癌,细胞,肿瘤转移,干涉

文献来源: 第四军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术作为一种新的基因阻断技术,具有特异、有效的基因沉默效应,能够简单、高效地阻抑特定基因的表达。这一技术已经被广泛用于操纵基因在哺乳动物和人类细胞的表达、阐明信号途径、识别基因功能和疾病治疗。在肿瘤治疗方面,有学者发现,在多种细胞系中引入siRNA,其连续表达可诱导稳定的同源靶基因抑制。如果癌基因过表达引起细胞生长和增殖失控,特异性抑制癌基因活性就可以逆转肿瘤细胞表型,控制肿瘤细胞生长和增殖,这一点已在Hela细胞、肺腺癌细胞、肝癌细胞、卵巢癌细胞和黑色素瘤细胞中得到证实。还有研究表明应用RNAi技术可明显抑制高侵袭力人乳腺癌细胞的迁移和神经胶质瘤的生长侵袭,这些研究结果为RNAi应用于肿瘤治疗提供了良好的依据。 腺样囊性癌(ACC)是涎腺最常见的恶性肿瘤之一,约占涎腺恶性肿瘤的30%,易发生远处转移,主要发生在肺部。本研究以涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞系ACC-2及其肺高转移株ACC-M作为研究肿瘤转移分子机制的模型,首先采用基因芯片技术筛选不同转移力细胞的差异表达基因,从中选择转移相关靶基因,应用RNAi技术沉默其表达,一方面观察靶基因敲除对细胞生物学特性的影响,另一方面为肿瘤基因治疗提供思路。筛选发现基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因在ACC-M细胞中高表达。MMP-1是MMPs家族中表达最高的降解纤维胶原的间质胶原酶,许多肿瘤组织中有MMP-1的过表达,其表达与侵袭转移及不良预后相关,但MMP-1与SACC的相关性研究未见报道。本

论文目录:

缩略语表

中文摘要

英文摘要

前言

文献回顾

第一部分 人涎腺腺样囊性癌细胞转移相关基因的筛选

实验一、基因芯片筛选人涎腺腺样囊性癌细胞转移相关基因

1.材料和方法

2.结果

实验二、RT-PCR验证基因芯片筛选结果

1.材料和方法

2.结果

实验三、MMP-1在人涎腺腺样囊性癌高低转移细胞中的表达

1.材料和方法

2.结果

讨论

第二部分 用RNAi技术沉默ACC-M细胞中MMP-1基因的表达

实验一、MMP-1 shRNA真核表达载体的构建

1.材料和方法

2.结果

实验二、MMP-1 shRNA真核表达载体稳定转染细胞株的建立

1.材料和方法

2.结果

讨论

第三部分 MMP-1基因沉默对ACC-M细胞生物学特性的影响

实验一、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞形态学特性的影响

1.材料和方法

2.结果

实验二、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞增殖特性的影响

1.材料和方法

2.结果

实验三、MMP-1基因沉默对ACC-M细胞侵袭转移特性的影响

1.材料和方法

2.结果

讨论

小结

个人简历

致谢

发布时间: 2005-07-19

参考文献

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基质金属蛋白酶-1基因沉默抑制人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞ACC-M侵袭转移的研究
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