论文摘要
【研究背景与意义】乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）对人类健康危害严重,是引起急、慢性肝炎的病因,与肝硬化和肝癌的发生密切相关,因此研究HBV传播途径无论是对人类健康还是对病毒学本身的发展都具有十分重要的意义。掘调查,我国婴幼儿HBV感染约1/3系由乙肝表面抗原阳性的母亲将HBV传给婴儿引起感染所至,因此母婴垂直传播途径引起人们特别关注。目前已经清楚的母婴垂直传播途径有;①妊娠时经胎盘传播;②分娩期外伤或吸入羊水;③分娩后母乳喂养等。而真正意义的母婴垂直传播（true vertical transmission）,即“由HBV感染的卵母细胞,作为病毒基因的载体,与正常精子受精,在胚胎发育过程中,HBV基因随人基因组复制与表达,从而使子代患病”,目前仍是一种尚待证实的假说。本研究旨在证实这一假说。【材料与方法】研究用金黄地鼠和小鼠建立实验动物模型:将卵巢内注射HBV DNA的实验动物分成两组,一组注射后进行超排卵,收集卵巢和输卵管的卵母细胞,用PCR、Southern杂交,斑点杂交和荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization、FISH）检测HBV在卵母细胞内的存在和染色体上的整合;另一组超排雌鼠与正常雄鼠合笼,收集受精卵（金黄地鼠）和2-细胞胚（小鼠）,用FISH、RT-PCR和免疫荧光检测技术分别研究HBV基因在受精卵雌原核上的整合以及在2-细胞胚中的复制与表达。【结果】①PCR实验在金黄地鼠和小鼠的卵母细胞受检样本中均发现HBV DNA阳性条带;Southern试验在待检PCR产物中观察到明显的杂交信号。用最后几次洗液进行斑点杂交未发现HBV DNA阳性信号,排除了PCR和Southern阳性结果来自洗液污染的可能性。②FISH在一些卵母细胞的染色体、受精卵的雌原核和一些2-细胞胚的两个间期核上检测到HBV DNA阳性杂交信号;③RT-PCR在受检样本中发现HBx和HBs DNA阳性条带;④免疫荧光检测在受检2-细胞胚的胞浆中发现HBsAg阳性信号。【小结】①HBV DNA能够进入卵母细胞内并整合在染色体上;②正常受精时,卵母细胞能够作为载体将HBV基因带入受精卵内;③卵母细胞携带的HBV基因能够在小鼠早期胚胎中复制和表达;④本研究为HBV可经过雌性生殖细胞垂直传递提供了直接的科学证据。⑤本研究为在其他病毒性传染病中进行类似研究提供了理想的实验模型,进而有可能为临床医学基础研究展开一个新的领域。
论文目录
相关论文文献
- [1].卵母细胞捐赠相关问题及伦理争论[J]. 生殖医学杂志 2013(09)
- [2].皮质颗粒在评估卵母细胞胞质成熟中的相关应用[J]. 内蒙古中医药 2010(08)
- [3].人卵母细胞冷冻研究进展[J]. 医学综述 2019(24)
- [4].卵母细胞衰老的分子病因学研究进展[J]. 生殖医学杂志 2020(04)
- [5].玻璃化冷冻对哺乳动物MⅡ期卵母细胞表观遗传学的影响[J]. 中国畜牧兽医 2020(09)
- [6].褪黑素对老化卵母细胞体外发育能力的改善效果评价[J]. 生殖医学杂志 2017(05)
- [7].羊卵母细胞核成熟抑制剂及其作用效果的研究进展[J]. 中国草食动物科学 2012(S1)
- [8].3种药物对老化卵母细胞4种母源mRNA水平的影响[J]. 动物学杂志 2010(05)
- [9].动物卵母细胞透明带与受精的关系[J]. 井冈山学院学报 2008(04)
- [10].牛卵丘细胞对卵母细胞体外成熟与孤雌发育的影响[J]. 中国畜牧杂志 2008(07)
- [11].C型钠钛对犬卵母细胞体外成熟效果的影响[J]. 中国畜牧杂志 2020(06)
- [12].卵母细胞激活障碍的原因与对策[J]. 国际生殖健康/计划生育杂志 2018(03)
- [13].卵母细胞第一极体形态对受精结局的影响[J]. 广东医学 2016(24)
- [14].人类卵母细胞冷冻现状的研究进展[J]. 实用医技杂志 2014(03)
- [15].卵母细胞慢速冻融技术临床应用分析[J]. 湘南学院学报(医学版) 2014(02)
- [16].玻璃化冷冻人卵母细胞的临床应用:附一例成功分娩[J]. 生殖医学杂志 2009(02)
- [17].电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报 2009(10)
- [18].电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报 2009(18)
- [19].卵母细胞激活[J]. 生命的化学 2008(02)
- [20].西藏林芝牦牛卵母细胞体外成熟培养[J]. 高原农业 2018(01)
- [21].无原核有双极体的卵母细胞体外发育潜能及移植结局的探讨[J]. 中国性科学 2017(04)
- [22].体内、外卵母细胞对猪体细胞克隆胚胎发育潜力的影响[J]. 中国畜牧兽医 2017(11)
- [23].哺乳动物卵母细胞体外成熟的研究进展[J]. 黑龙江动物繁殖 2010(06)
- [24].排卵后卵母细胞老化的研究进展[J]. 国际生殖健康/计划生育杂志 2018(01)
- [25].探讨小鼠排卵后老化的卵母细胞对生殖发育的影响[J]. 中国妇幼保健 2016(23)
- [26].颗粒细胞在卵母细胞体外成熟中的作用[J]. 中国煤炭工业医学杂志 2015(08)
- [27].34个周期玻璃化冷冻卵母细胞临床应用分析[J]. 实用妇产科杂志 2014(10)
- [28].鹿卵母细胞体外成熟研究进展[J]. 特产研究 2013(02)
- [29].卵母细胞减数分裂阻滞与促黄体素诱导减数分裂恢复的分子机制研究进展[J]. 生理学报 2020(04)
- [30].人卵母细胞玻璃化冷冻的分子表达变化[J]. 国际生殖健康/计划生育杂志 2019(05)