营养及培养条件对大豆根腐病主要病原菌及其产毒的作用

论文摘要

试验根据不同病原菌毒素特有的紫外吸收光谱,应用紫外分光光度计定量原理,建立了病原菌毒素相对浓度定量测定方法,为大豆根腐病主要病原菌毒素的定量研究奠定了基础。得出镰孢菌和立枯丝核菌毒素浓度与其紫外吸光值（ODT）间的关系式:镰孢菌毒素浓度（ug/ml）=-9.7895+1.5449 ODT （F=319.0103 R=0.9846）立枯丝核菌毒素浓度（ug/ml）=-6.9853+1.3009ODT （F=748.5542 R=0.9934）本论文通过系统量化试验,明确了不同培养条件（培养基、温度、通气量、pH值、光照）,大量元素（C、N、P、K）和微量元素（B、Mn、Mo、Cu、Zn）对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长及产毒3项指标的定量作用,为大豆根腐病的调控提供了依据。对镰孢菌产孢试验结果,在PD和PSC中产孢显著高于Richard和Ceapek。在5-30℃之间,随温度升高产孢量增加,30℃达到最高,30℃以上随温度增加产孢量减少。pH在58之间,随pH增加尖镰孢菌产孢减少,茄镰孢菌产孢增加,pH﹤5或﹥8均不适合产孢。通气越强产孢越少。Cu、Zn随浓度增加对产孢抑制作用增强。Mn、Mo、Cu对产孢有一定促进作用。对镰孢菌产孢的最适培养条件为PD和PSC、30℃、pH=67、振荡频率在4080 r/min。尖镰孢菌和茄镰孢菌产孢最适营养组合C30N15P1K0.5（C、N、P、K分别为30/15/1/0.5g/L）和C30N5P0.5K0.5。当Mn为30mg/L、Mo为0.8mg/L、Cu为1.8mg/L时促进产孢。对于镰孢菌菌丝,在PSC中生长最好。在5-30℃之间,随温度升高菌丝生长增强,至25-30℃菌丝生长达最高,30℃以上随温度增加菌丝生长减弱。pH在37之间,随pH增加菌丝生长增加,pH﹥8时菌丝生长减弱。培养液中N含量越高菌丝生长效果越好。Mn、Mo、B在供试的浓度下均对菌丝生长有抑制作用,浓度越高抑制作用越强。筛选出的菌丝生长最适培养条件为PSC、25℃、pH=7、振荡频率在120160 r/min。最适营养元素处理为C30N15P0.5K1和C20N15P1.5K1.5,Cu为1.8mg/L、Zn为1.2mg/L。对于镰孢菌产毒,在PSC中产毒最好,在5-30℃之间,随温度增加产毒增强,至25-30℃达到最大,30℃以上随温度增加产毒量减少。pH在37之间,随pH增加产毒增强,至pH=7时达最好,pH﹥8时随pH增加产毒减弱。通气状况越好产毒量越高。试验中N含量越高产毒越好。Mn、Mo、B在供试浓度下对各镰孢菌产毒均有抑制作用。筛选出对产毒最适合培养条件为PSC、25℃、pH=7、振荡频率为160r/min。最优营养元素组合分别为C20N15P0.5K0.5、C40N15P0.5K0.5和C20N15P1K1,Cu为1.8mg/L、Zn为1.2mg/L。不同培养条件对立枯丝核菌菌丝生长及产毒的试验结果表明:在5-30℃之间,随温度升高菌丝生长加快、产毒增强,至25-30℃菌丝生长和产毒达到最好,30℃以上随温度增加菌丝生长、产毒降低。pH在57之间,随pH增加菌丝生长、产毒增强,pH﹥8时随pH增加菌丝生长、产毒减弱。通气可促进菌丝生长及其产毒。N含量增加促进菌丝生长。Mn、Mo、B随浓度增加对菌丝生长和产毒抑制作用增强。由此得出其菌丝生长的最适培养条件为Richard、30℃、pH=7、振荡频率为80 r/min。最适的营养元素处理为C20N15P1.5K0.5,Cu为1.8mg/、Zn为1.2mg/L。对产毒最适合培养条件为Richard、25℃、pH=8、振荡频率为80 r/min。最适的营养元素组合为C30N15P1K1.5,Cu、Zn分别为1.8mg/L和1.2mg/L。不同条件和因素下,病原菌的产孢,菌丝生长及其产毒都有所不同,而产孢量,菌丝生长量和产毒量在病原菌致病中的作用既有区别又相互联系,本试验引入综合作用指数来衡量某一因素对病原菌产孢、菌丝生长和产毒这3项指标的综合作用。根据综合作用指数镰孢菌3项指标最适培养条件为PSC、2530℃、pH=67、振荡频率为160r/min。最佳营养元素组合为C30N15P1.5K1.5。最具抑制作用的培养条件Richard、15℃、pH=9、静止培养。最具抑制作用营养元素组合为C20N5P0.5K0.5。立枯丝核菌最适培养条件为Richard、2530℃、pH=7、振荡频率80 r/min。最佳营养元素组合为C20N15P1.5K1.5。最具抑制作用的培养条件Ceapek、15℃、pH=5、静止培养。最具抑制作用营养元素组合为C20N5P0.5K0.5。Mn、B、Mo当浓度分别为60mg/L、2mg/L、0.8mg/L时对4种大豆根腐主要病原菌产孢、菌丝生长及产毒3项综合指标具有显著的抑制效果。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 大豆根腐病研究进展
• 1.1.1 大豆根腐病的分布与危害
• 1.1.2 大豆根腐病的症状
• 1.1.3 大豆根腐病的病原
• 1.1.4 病害侵染循环及影响发病因素
• 1.1.5 大豆根腐病的防治
• 1.2 植物病原菌毒素研究进展
• 1.2.1 植物病原菌毒素的种类和特点
• 1.2.2 病原菌毒素的分离和纯化
• 1.2.3 真菌毒素生物活性测定方法
• 1.2.4 植物病原菌毒素的致病机理
• 1.2.5 植物病原菌毒素的应用
• 1.3 大豆根腐病原菌毒素的研究现状
• 1.4 大豆根腐病研究与防治存在的问题
• 1.5 论文研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 供试菌株
• 2.1.2 供试培养基
• 2.1.3 大量元素
• 2.1.4 微量元素
• 2.1.5 供试大豆品种
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 培养条件及营养对大豆根腐主要病原菌产孢及菌丝生长的影响
• 2.2.2 病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法
• 2.2.3 培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产毒的影响
• 2.2.4 培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用
• 3 结果与分析
• 3.1 培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢及菌丝生长的影响
• 3.1.1 培养条件对病原菌产孢及菌丝生长的影响
• 3.1.2 大量元素对病原菌产孢及菌丝生长的作用
• 3.1.3 微量元素对病原菌产孢及菌丝生长的作用
• 3.2 病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法
• 3.2.1 镰孢菌粗毒素相对浓度的测定
• 3.2.2 立枯丝核菌粗毒素相对浓度的测定
• 3.3 培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产毒的作用
• 3.3.1 培养条件对病原菌产毒的影响
• 3.3.2 大量元素对病原菌产毒的作用
• 3.3.3 微量元素对病原菌产毒的作用
• 3.4 培养条件及营养对大豆根腐病主要病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用
• 3.4.1 培养条件对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用
• 3.4.2 大量元素对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用
• 3.4.3 微量元素对病原菌产孢、菌丝生长、产毒综合作用
• 4 讨论
• 4.1 病原菌粗毒素量化指标及产毒量测定方法
• 4.2 关于综合作用指数和综合抑制指数
• 4.3 关于微量元素对病原菌作用试验结果
• 5 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文