神经生长因子对大鼠脑缺血再灌注后TGF-β1和IL-1β表达的影响

论文摘要

目的:本实验利用大鼠中动脉缺血再灌注模型（MCAO）,以免疫组织化学方法观察脑缺血2h再灌注不同时间点转化生长因子-β1 （transforming growth factor-β1）和白介素-1β（Interleukin-1β）的表达,并观察NGF对其表达的影响,探讨神经生长因子（nerve growth factor）的脑保护作用,为临床应用NGF治疗脑梗死提供理论依据。方法:健康成年SD大鼠55只（由大连医科大学实验动物中心提供）,雌雄不限,体重200-250克,清洁级,饲养环境温度21℃,自由进食水。随机分为假手术组5只（第1组）,对照组30只,按缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、72h再分为6组（分别为第2、3、4、5、6、7组）,每组5只,NGF组10只（第8组）和生理盐水对照组10只（第9组）。参照Nagasawa报告的方法,用10%的水合氯醛（0.35毫升/100毫克腹腔注射）麻醉动物,取仰卧位固定在手术台上,行右侧大脑中动脉闭塞术,颈部正中切口,分离出右侧颈总、颈外和颈内动脉,结扎颈外动脉分支起始处,颈总动脉近心端,在颈总动脉分叉处剪一小口,把头端蘸有肝素的直径为0.2mm的高弹力鱼线向颈内动脉端插入,继续向前推进直到感觉有轻微阻力,即约18mm,提示已到大脑中动脉起始部。2h后缓慢拔出鱼线即可实施再灌注。动物苏醒后观察其体态及行为,以判断大脑中动脉闭塞模型成功与否。假手术组插入鱼线后马上抽出,余步骤同手术组。缺血再灌注模型动物清醒后,左侧前肢屈曲内收者为研究对象。第8组大鼠分别于再灌注后2h、24h肌肉注射NGF（每100克体重NGF 500BU/0.1毫升）,第9组以同样方法注入相同体积的无菌生理盐水。按Zea Long 5分制标准评分进行各组大鼠神经功能评价:经过免疫组化和HE染色检测大鼠脑内TGF-β1和IL-1β的表达。结果:（1）神经功能评分:2-9组分别为:2.000±0.7071,2.200±0.4472,2.400±0.5477,2.600±0.5477,2.800±0.4472,3.000±0.0000,1.400±0.6253, 2.300±0.3650 ,2.200±0.6903,3.100±0.0038。其中NGF组（8组）与相应的缺血再灌注盐水（9组）对照组比较,神经功能障碍明显减轻。（P﹤0.01）。（2）脑缺血再灌注后,大鼠脑内IL-1β的表达量增多,并于再灌注后2h达高峰,以后逐渐减少。TGF-β1于24h达高峰,以后逐渐减少。（P﹤0.01）。与缺血再灌注组相比,肌肉注射NGF,可使脑内,TGF-β1表达量增多,IL-1β的表达量减少。（P﹤0.01）。结论:肌肉注射NGF对脑缺血再灌注有明显的保护作用,IL-1β的表达量减少及TGF-β1表达增多可能是其机制之一。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢