黄敬1杨胜波1杨帆2牛刚2
（1、贵阳中医学院550000；2、贵阳中医学院第二附属医院550000）
摘要：目的：探讨龙胆泻肝汤对大鼠体外循环(CPB)后肝损伤的保护机制。方法：随机将60只体重为480±20g的SD大鼠分为对照组（A组）、龙胆泻肝汤组（B组），每组30只大鼠，各组大鼠在体外循环后，测定SATA5活性，全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量。结果：与A组比较，B组各时相肝脏组织SATA5活性明显升高（p<0.05），血清中谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量明显降低（p<0.05）。结论：龙胆泻肝汤能对体外循环（CPB）后肝损伤有防治作用，其中，通过提高肝脏组织内SATA5的活性是其作用机制之一。
关键词：龙胆泻肝汤；体外循环；STAT5活性；肝损伤；谷丙转氨酶
【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-7165（2015）13-0334-02
体外循环(CPB)是现临床手术中较常见的辅助手段，是手术成功的关键之一，但其有也有很多相关并发症，如体外循环对机体产生强烈应激而导致多器官功能障碍综合征(MODS)［1］，病死率高，其相关的肝损伤是最早及最容易导致的并发症之一，肝损伤发生后甚至可发展成肝衰竭［2-6］等，最终会形成MODS，治愈率大大降低，是导致患者死亡主要原因。有研究表明龙胆泻肝汤具有清热利湿作用，可改善肝脏的生理功能，对体外循环(CPB)后肝脏的损伤有一定保护作用。本实验通过观察龙胆泻肝汤对大鼠体外循环(CPB)后相关肝损伤的防治作用，并探讨其作用机制，现将具体内容报告如下：
1、材料和方法
1.1动物分组及处理：Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，体重480±20g，雌雄不限，动物随机分为对照组（A组）、龙胆泻肝汤组（B组），各组制备成体外循环后0h、1h、3h、6h、9h和18h分为6组，每组5只。
1.2药品：龙胆泻肝汤(贵阳中医学院第二附属医院)
1.3方法：术前3周A组给水喂养，B组灌胃给龙胆泻肝汤(贵阳中医学院第二附属医院)，术前禁食12h，禁饮6h，术前使用乌拉坦(1mg/kg)腹腔注射麻醉，采用22G静脉留置针经动脉逆行插入作为动脉灌注管；经右颈静脉将18G静脉留置针穿刺直至右心房水为静脉引流管。在贮血器和氧合器之间有旁路管道便于排除气泡(Figure2-2,2-3)。预充液总量14-18ml，其中氧合器和热交换器共8-10ml，其它管道6-8ml。成分：新鲜的同种大鼠血液(8～12)ml(术前由1只大鼠的颈动脉穿刺抽取并肝素化)、血定安4ml、5％碳酸氢钠2ml、20％甘露醇2ml、肝素钠150IU/kg。各部分连接管道妥善固定后，打开静脉引流端使得静脉血回流到贮血器，然后动脉灌注管，开始转流。转流开始后停止呼吸机辅助呼吸，氧合器供氧(FiO21.0)，氧流量与灌注流量比值保持在0.8～1.0，建立并行体外循环，转流时间约120min后停止CPB。
1.4检测指标：各组分别于造模成功后0h、1h、3h、6h、9h和18h小时处死5只大鼠，经下腔静脉无菌取血，肝素抗凝，立即4℃，3000rpm，离心15min，取上清置于﹣70℃冰箱保存，EMSA法检测SATAT5相对活性，全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素(TB)的含量。
1.5统计学处理
利用SPSS20.0统计软件进行统计分析，计量资料均以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用配对t检验，取α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组不同时间点大鼠肝脏组织SATA5相对活性变化情况（x±s，n=5）A组、B组在CPB后大鼠血浆ALT(IU/L)、血清TB(μmol/L)含量早期明显升高，3h后上升到高峰，6h后缓慢下降，18h后基本恢复正常，与A组比较，B组差异显著，（▲P<0.05，▲▲P<0.01）。
讨论
CPB过程中对器官的保护是外科临床研究中热点领域之一。一直以来，很多专家对CPB所导致的除肝脏以外很多的脏器研究很多，而对肝脏却缺乏深入系统研究。肝脏是应激反应的中心器官和重要靶器官之一，而肝脏是体外循环后所有受累器官中最易损伤的器官，虽然过去对体外循环后肝脏损伤的治疗有相关研究报道，但均无良好疗效，所以通过研究中医中药对保护CPB后的肝脏损伤尤为必要。
临床研究表明，CPB术后会有较高比例肝酶谱升高、高胆红素血症(23.2-35.1%)等，高胆红素血症是由结合和非结合胆红素共同升高所致，而胆红素的转运则完全依赖于位于肝脏组织SATAT5的调控，其活性的表达异常有可能导致肝细胞胆汁淤积和肝细胞受损，而这类基因表达的信号调控机制尚未完全阐明。不过已有研究表明STAT5信号途径具有广泛的生物学效应，可促进合成代谢、刺激细胞再生、抗凋亡、调节急性期反应、稳定肠粘膜屏障等功能。相关研究已证实：龙胆泻肝汤具有清热利湿作用，可改善肝脏的生理功能，对体外循环(CPB)后肝脏的损伤有一定保护作用，并可以提高STAT5的活性。
因此，本实验通过龙胆泻肝汤对体外循环后肝损伤大鼠的实验观察，结论如下：在血生化方面，B组各时相ALT、TB的含量较A组均明显降低。与A组比较，B组SATA5相对活性显著上升，由此表明，龙胆泻肝汤可以提高肝脏组织中SATA5相对活性，从而对体外循环后肝脏起到一定程度的保护。
本研究证实：龙胆泻肝汤对体外循环后所导致的大鼠肝脏损伤有一定的保护作用，可能提高SATA5相对活性的表达是减轻肝脏损伤的机制之一。
参考文献：
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